- Шта је нефелометрија?
- Дисперзија зрачења честицама у раствору
- Непхелометер
- ДО.
- Б.
- Ц.
- Д.
- И.
- Одступања
- Метролошке карактеристике
- Апликације
- Откривање имуног комплекса
- Нефелометрија крајње тачке:
- Кинетичка нефелометрија
- Друге апликације
- Референце
Непхелометри обухвата мерење зрачења узрокована честицама (у раствору или суспензији) и мерење моћ расутог зрачења под углом у односу на смер упадног зрачења.
Када је суспендована честица погодјена снопом светлости, појављује се део светлости који се одбија, други део се апсорбује, други се одбија и остатак се преноси. Због тога када светлост удари у транспарентан медијум у коме постоји суспензија чврстих честица, суспензија је мутна.
Шта је нефелометрија?
Дисперзија зрачења честицама у раствору
У тренутку када светлосни сноп погоди честице суспендоване супстанце, смер ширења снопа мења смер. Овај ефекат зависи од следећег:
1.Димензије честице (величина и облик).
2. Карактеристике суспензије (концентрације).
3. Дужина таласа и интензитет светлости.
4.Укључна светлосна удаљеност.
5. Угао откривања.
6. Индекс лома медија.
Непхелометер
Нефелометар је инструмент који се користи за мерење суспендованих честица у течном узорку или у гасу. Тако фотоћелија постављена под углом од 90 ° према извору светлости детектује зрачење из честица које се налазе у суспензији.
Исто тако, светлост коју рефлектирају честице према фотоћелији зависи од густине честица. Дијаграм 1 представља основне компоненте које чине нефлометар:
Слика 1. Основне компоненте нефелометра.
ДО.
У нефелометрији је од пресудне важности извор зрачења са високим светлосним снопом. Постоје различите врсте, у распону од ксенонских лампи и живих паре, халогенских жаруља из волфрама, ласерског зрачења.
Б.
Овај систем је смештен између извора зрачења и кивете, тако да се на тај начин на кивети избегава зрачење различитих таласних дужина у поређењу са жељеним зрачењем.
У супротном, реакције флуоресценције или ефекти загревања у раствору изазвали би одступања од мерења.
Ц.
То је углавном призматична или цилиндрична посуда, а може имати различите величине. Ово је решење које се проучава.
Д.
Детектор се налази на одређеној удаљености (углавном врло близу кивете) и задужен је за детекцију зрачења распршеног честицама у суспензији.
И.
Генерално, то је електронска машина која прима, претвара и обрађује податке, што су у овом случају мерења добијена из спроведене студије.
Одступања
Свако мерење подлеже проценту грешке, који углавном даје:
Контаминиране кивете: у киветама свако средство које је ван испитиваног раствора, било унутар или изван кивете, смањује блиставу светлост на путу ка детектору (неисправне кивете, прашина која пријања на зидове кивете).
Интерференције : присуство микробиолошког загађивача или мутноће распршује енергију зрачења, повећавајући интензитет дисперзије.
Флуоресцентна једињења : то су она једињења која, када су побуђена инцидентним зрачењем, изазивају погрешна очитавања и велике густине расипања.
Чување реагенса : Неадекватна температура система може проузроковати неповољне услове испитивања и може довести до присуства мутних или исталожених реагенаса.
Флуктуације електричне снаге : да се спречи да случајно зрачење буде извор грешке, за једнолико зрачење препоручују се стабилизатори напона.
Метролошке карактеристике
Будући да је снага зрачења откривена директно пропорционална масној концентрацији честица, нефелометријска испитивања имају -у теорији- већу метролошку осетљивост од осталих сличних метода (као што је турбидиметрија).
Даље, ова техника захтева разблажене растворе. То омогућава да се минимизирају и феномени апсорпције и рефлексије.
Апликације
Нефелометријске студије заузимају веома важно место у клиничким лабораторијама. Примене варирају од одређивања имуноглобулина и протеина акутне фазе, комплемента и коагулације.
Откривање имуног комплекса
Када биолошки узорак садржи антиген који вас занима, он се меша (у пуферском раствору) са антителом да би се створио имунолошки комплекс.
Нефелометрија мери количину светлости која се распршује реакцијом антиген-антитело (Аг-Ац) и на тај начин се откривају имуни комплекси.
Ова студија се може извести на два начина:
Нефелометрија крајње тачке:
Ова техника се може користити за анализу крајње тачке, у којој се антитело испитиваног биолошког узорка инкубира током двадесет и четири сата.
Аг-Ац комплекс се мери нефелометром, а количина распршене светлости упоређује се са истим мерењима која су извршена пре него што је комплекс формиран.
Кинетичка нефелометрија
У овој методи се континуирано прати брзина стварања комплекса. Брзина реакције зависи од концентрације антигена у узорку. Овде су мерења узета као функција времена, тако да се прво мерење врши у тренутку „нула“ (т = 0).
Кинетичка нефелометрија је најчешће коришћена техника, будући да се истраживање може извести за 1 сат, у поређењу са дугим временским периодом методе крајње тачке. Количина дисперзије се мери непосредно након додавања реагенса.
Стога, све док је реагенс константан, количина присутног антигена се сматра директно пропорционалном брзином промене.
Друге апликације
Нефелометрија се обично користи у анализи хемијског квалитета воде, за одређивање бистрине и за контролу процеса њеног третмана.
Такође се користи за мерење загађења ваздуха у коме се концентрација честица одређује из дисперзије коју стварају у ударном светлу.
Референце
- Британница, Е. (друго). Нефелометрија и турбидиметрија. Опоравак од британница.цом
- Ал-Салех, М. (друго). Турбидиметрија и нефелометрија. Преузето са пдфс.семантицсцхолар.орг
- Бангс Лабораториес, Инц. (нд). Опоравак од тецхноцхемицал.цом
- Мораис, ИВ (2006). Турбидиметријска и нефелометријска анализа протока. Добијено из репозиторија.уцп.п
- Сассон, С. (2014). Принципи нефелометрије и турбидиметрије. Опоравак од нотесониммунологи.филес.вордпресс.цом
- Станлеи, Ј. (2002). Основе имунологије и серологије. Албани, НИ: Тхомпсон Леарнинг. Добијено од боокс.гоогле.цо.ве
- Википедиа. (сф) Нефелометрија (лек). Опоравак са ен.википедиа.орг