- Историја
- Чему служи Бенедикт реагенс?
- Откривање глукозе у урину
- Бојање раствора
- Детекција различитих моносахарида и дисахарида
- Компоненте
- Процедура употребе
- Бенедиктова тест реакција
- Припрема Бенедикт реагенса
- Референце
Тхе Бенедицт 'С реагенс је плави раствор бакар који се користи да детектује присуство смањења шећера: алдехиде, алфа-хидрокси кетона и хемикетали. Развио га је Станлеи Р. Бенедицт (1884-1936).
За шећер-алфа-хидрокси-кетон карактеристично је да има хидроксилну групу у близини кетона. У међувремену, хемикетал је једињење које је резултат додавања алкохола алдехиду или кетону. Бенедикт реагенс неселективно реагује на све ове редуцирајуће шећере.

Обојења епрувета након додавања Бенедицтовог реагенса омогућавају нам да полуквалитетно знамо колико је редукујућих шећера растворено. Извор: Тхебиологипример
Бенедиктова метода заснива се на редукционом деловању шећера на Цу 2+ , који је плаве боје, који га претвара у Цу + . Цу + формира циглено црвени талог бакровог оксида. Међутим, зависно од концентрације шећера, појављује се спектар боја (горња слика).
Имајте на уму да ако се Бенедицт-ов реагенс дода у епрувету без смањења шећера (0%), он не подноси промене у својој плавкастој боји. Тако, када је концентрација већа од 4%, епрувета је обојена браон.
Историја
Реагенс је створио амерички хемичар Станлеи Росситер Бенедицт 1909. године, који је објавио свој научни чланак "реагенс за откривање редуцирајућих шећера", у часопису Ј. Биол. Цхем.
Даље, Левис и Бенедицт (1915) објавили су методу за одређивање редукције шећера у крви, користећи пират као индикатор; али је прекинута због недостатка специфичности.
Бенедиктов реагенс је веома сличан Фехлинговом. Разликују се по томе што Бенедикт користи јон цитрата и со натријум карбоната; док Фехлинг користи тартаратни јон и натријум хидроксид.
Бенедиктов тест квалитативан је, односно открива само присуство редуцирајућих шећера. Међутим, Бенедицт-ов реагенс може бити квантитативан ако садржи калијум тиоцијанат у раствору који формира бели талог бакар-тиоцијаната који се може титрирати коришћењем глукозних стандарда.
Чему служи Бенедикт реагенс?
Откривање глукозе у урину
Бенедицт-ов реагенс се још увек користи за откривање присутности глукозе у урину и показатељ је дијабетесне болести код пацијента, чија је урина подвргнута Бенедикт тесту. Иако се не може искључити да глукозурија има другачије порекло.
На пример, појачана гликозурија је пронађена у условима као што су: трудноћа, примарна бубрежна гликозурија, бубрежна тубуларна ацидоза, примарни или секундарни Фанцонијев синдром, хипералдостеронизам и акутни панкреатитис или карцином панкреаса.
Бенедицт-ов реагенс је плаве боје због присуства Цу 2+ , који се редукује до Цу + дејством смањења шећера; у овом случају глукоза, формира талог црвеног бакар (И) оксида од опеке.
Бојање раствора
Обојење и формирање талога у Бенедикт-овом тесту примењеном на урин варира у зависности од концентрације шећера који се смањује. Ако је концентрација глукозе у мокраћи мања од 500 мг / дЛ, раствор позелени и не настаје талог.
Концентрација глукозе у урину од 500-1000 мг / дЛ изазива зелени талог у Бенедикт тесту. У концентрацији већој од 1.000 до 1.500 мг / дл, изазива стварање жутог талога.
Ако је концентрација глукозе 1.500 - 2.000 мг / дЛ, видеће се наранџасти талог. Најзад, концентрација глукозе у урину већа од 2.000 мг / дл, проузроковаће стварање талога од цигле-црвене боје.
Ово указује да Бенедикт тест има полуквантитативни карактер, а о резултатима се извештава коришћењем крстова. Тако, на пример, формирање зеленог талога одговара крсту (+); и формирање талога од опеке црвене боје, одговара четири крижа (++++).
Детекција различитих моносахарида и дисахарида
Бенедицт-ов реагенс открива присуство редуцирајућих шећера који имају слободну функционалну групу или слободну кетонску функционалну групу, као део њихове молекуларне структуре. То се односи на глукозу, галактозу, манозу и фруктозу (моносахариди), као и за лактозу и малтозу (дисахариди).
Сахароза и скроб не реагирају с Бенедиктовим реагенсом јер имају слободне редуктивне групе. Поред тога, постоје једињења која ометају Бенедикт тест у урину, дајући лажну позитивност; такав је случај са салицилатом, пеницилином, стрептомицином, леводопом, налидиксичном киселином и изониазидом.
У урину постоје хемикалије које могу умањити Бенедикт реакцију; на пример: креатинин, урат и аскорбинска киселина.
Компоненте
Компоненте Бенедицт-овог реагенса су следеће: бакар-сулфат пентахидрат, натријум-карбонат, трисатријум-цитрат и дестилована вода.
Бакар сулфат пентахидрат, ЦуСО 4 · 5Х 2 О, садржи Цу 2+ : то је једињење које даје Бенедицт-ов реагенс њен плаве. Редуктивни шећери делују на Цу 2+ , узрокујући његово смањивање на Цу + и формирање талога црвено-црвеног талога бакровог оксида (Цу 2 О).
Натријум-карбонат ствара алкални медијум неопходан за редукцију бакра. Натријум-карбонат реагира са водом, стварајући натријум бикарбонат и хидроксил-јон, ОХ - , који су одговорни за алкалност медијума потребног да се догоди редуктивни процес.
Натријум-цитрат формира комплекс са бакром (ИИ) који спречава да се током складиштења редукује до Цу (И).
Процедура употребе
5 мл Бенедицт-овог реагенса се стави у епрувету од 20 к 160 мм и дода се 8 капи урина. Епрувета се лагано протресе и стави у посуду са кипућом водом на 5-10 минута.
Након тог времена, епрувета се уклања из купатила са топлом водом и површина се хлади текућом водом да би се коначно очитали резултати добијени приликом обављања Бенедикт теста (боје).
Бенедиктова тест реакција
Редукција Цу (ИИ) током Бенедикт теста може се схематизовати на следећи начин:
РЦХО + 2 Цу 2+ (у комплексу) + 5 ОХ - => РЦОО - + Цу 2 О + 3 Х 2 О
РЦХО = алдехид; РЦОО - = (карбоксилат јон); Цу 2 О = бакров оксид, талог од црвене цигле.
Припрема Бенедикт реагенса
Измери се 173 грама натријум-цитрата и 100 грама натријум-карбоната и раствори се у 800 мл топле дестиловане воде. Ако се примете трагови нерастворених материја, раствор се мора филтрирати.
С друге стране, 17,3 грама куријум сулфат пентахидрата растворено је у 100 мл дестиловане воде.
Потом се два водена раствора лагано мешају и наставља се непрестано мешање, допуњавајући до 1.000 мЛ дестиловане воде.
Референце
- Грахам Соломонс ТВ, Цраиг Б. Фрихле. (2011). Органска хемија. Амини. (10 Тх издање.). Вилеи Плус.
- Цларк Ј. (2015). Оксидација алдехида и кетона. Опоравак од: цхемгуиде.цо.ук
- Википедиа. (2020). Бенедикт реагенс. Опоравак од: ен.википедиа.орг
- Уреднички тим. (9. јануара 2019). Бенедиктов тест: принцип, припрема реагенса, поступак и тумачење. Опоравак од: лабораторијаинфо.цом
- Др Вхитсон. (сф) Бенедикт реагенс: тест за смањење шећера. Опоравак од: нку.еду
