САФРАНИН: КАРАКТЕРИСТИКЕ, УПОТРЕБА, ТЕХНИКЕ, ТОКСИЧНОСТ - ХЕМИЈА - 2025

Сафранин је мерикуиноиде боја, названа по својој хемијској структури која има две бензеноид прстена и од 2 куиноид прстенова, касније изазивају оне који пружају црвену боју.

Назива се и диметил сафранин или основни црвени 2 у свом кратком облику, пошто је његово научно име 3,7-диамино-2,8-диметил-5-фенил-феназиниумклоро диметил сафранин, а хемијска формула је Ц ₂₀ Х ₁₉ Н ₄ Цл.

Хемијска структура сафранина који указује на бензеноидне и киноидне прстенове / Водени раствор сафранина. Извор: НЕУРОтикер уредио МСц. Мариелса Гил / ЛХцхеМ

Постоји варијанта која се назива триметил-сафранин, али нема значајне разлике између две супстанце.

Сафранин је једнобојно бојило и у зависности од карактеристика хемијске формуле је супстанца са позитивним наелектрисањем. Стога има афинитет према негативно набијеним структурама. Ове структуре ће бити обојене црвено.

Ово својство му даје применљивост у многим хистолошким техникама за бојење различитих ћелијских структура, и еукариотских и прокариотских организама.

Сафранин се користи као контрастно бојило у важним и добро познатим техникама за рутинску употребу у бактериологији. Ове технике су: мрља по Граму-Хуцкеру, мрља Сцхаеффер Фултон за споре или мрље између бактеријских капсула.

карактеристике

Боја шафрана (зачин добијен стигмама цветова Цроцус сативус) била је инспирација за именовање ове боје. Од термина шафран долази име сафранин. То је због велике сличности боје шафрана и обојења коју пружа ова боја.

Сафранин је доступан у облику кристала или праха, а обе презентације су растворљиве у води. Боја сафранина нема мирис. Ставке мрља су црвене. Структуре које привлаче сафранинску боју називају се сафранофили.

Структурно је сафранин сложен, има два бензеноидна прстена на крајевима, а у средини су два квиноидна прстена где се налази Н ⁺ катион . Средиште структуре је систем задужен за пружање боје. Због ове карактеристике, ово је обојено средство класификовано у ИИ категорију.

Употреба

Сафранин се користи за бојење различитих структура. Посебно се истичу Кулчичке ћелије присутне у гастроинтестиналном тракту, које се такође називају ћелије ентерохромафина.

Способна је да обоји микроорганизме из породице Рицкеттсиацеае. Такође се користи у разним техникама, као што је Костер метода, модификована која се користи за бојење бактерија рода Бруцелла.

Са друге стране, сафранин се користи у техници бојења споре Сцхаеффер Фултон и у бојењу по Граму-Хуцкеру. У обје технике, сафранин дјелује као контрастно бојило.

У првом, споре попримају боју малахит зелене боје, а остале структуре црвени је сафранин. У другој фази, грам-негативне бактерије губе боју љубичасте кристале у фази уклањања боје, па је сафранин онај који обојава Грам негативне бактерије у црвене боје.

Поред тога, сафранин се користи у бактериологији за припрему Бруцелла агар медија са разблаживањем сафранина 1: 5000. Овај медијум служи за разликовање врста Бруцелла суис од осталих врста. Бруцелла мелитенсис и Бруцелла абортус расту на овом медијуму, али Б. суис је инхибиран.

На агроиндустријском пољу, сафранин је коришћен у количини од 2,25% и разблажен 1:10 за бојење матичних узорака из биљке шећерне трске.

Ову биљку најчешће погађа бактерија Леифсониа кили субсп. ксили, који оштећује ксилем биљке. Обојене стабљике оцењују се да би се одредила функција крвних жила.

Технике из области бактериологије

Цастанеда мрља за р бојење

Размазивањем крви или ткива се стави у пуфер (фосфатни пуфер пХ 7,6). Оставити да се спонтано осуши, а затим покрити метилен плавим током 3 минута и супротставити сафранином. Рицкеттсиае су обојени у плаву боју, контрастно црвеној позадини.

Костер флека модификована за

Направа се размазује и запали у упаљачу за фиксацију. Затим се прекрива мешавином 2 дела засићеног воденог сафранина са 3 дела 1 мол / Л раствора КОХ, током 1 минута. Изводи се испирање дестилованом водом и супротставља се 1% карболичном метилен плавом боку.

Ако узорак садржи бактерије рода Бруцелла, на плавој позадини ће се појавити наранџасте.

Бојење бактеријске капсуле

Смеша суспензије бактерија се прави са индијском мастилом и додаје се сафранин. Под микроскопом ће се око сваке бактеријске капсуле појавити црвенило који има црну позадину.

Бојење спора

Суспензија се врши бактеријском суспензијом. Затим се фиксира на топлоту. Прекривен је 5% малахитним зелењем, пламтећи често до испуштања пара. Поступак се понавља 6-10 минута. Коначно, испере се водом и супротстави се 0,5% сафранина током 30 секунди. Бацили се мрље црвено, а споре зелено.

Мрља по Граму-Хуцкеру

Направа се размазује бактеријском суспензијом и фиксира на топлоти. Покријте тобоган кристално љубичастом 1 минуту. Потом се лугол ставља као раствора током 1 минута. Након тога се избељи ацетонским алкохолом и на крају супротстави сафранином у трајању од 30 секунди.

Грам позитивне бактерије мрљају плавкасто љубичасту боју, а грам негативне бактерије црвено.

Неке лабораторије су престале да користе Грам-Хуцкерову технику како би усвојиле модификовану технику Грам-Копелофф. У потоњем, сафранин је замењен основним фуксином. То је зато што сафранин слабо обојава врсте рода Легионелла, Цампилобацтер и Бруцелла.

Технике из области хистологије

Бојење Кулцхитске ћелије (ентерохромаффинс)

Одсеци ткива из гастроинтестиналног тракта обојени су сребрним хлоридом. Затим се деколорише са натријум-тиосулфатом и на крају супротстави сафранину.

Кулцхитске ћелије одликују се црно-браон гранулама.

Остеоартритис мрља

Пошто сафранин има позитивно наелектрисање, веома се добро веже за карбоксилне и сулфатне групе гликозаминогликана. То су део протеогликана који чине зглобне хрскавице. У том смислу, приликом бојења сафранином О, могуће је утврдити да ли постоји или не постоји губитак хрскавице.

Губитак хрскавичног ткива може се мерити Манкиновом скалом или такође названом скалом остеоартритиса.

Техника је објашњена у даљем тексту: хистолошки одељак је уроњен у лежиште са Веигертовим раствором хематоксилина гвожђа, затим прошао кроз кисели алкохол и испран водом.

Наставите поступак бојања потапањем лима у зелену боју, исперете га сирћетном киселином, а сада је уроните у сафранин О. Да би завршио поступак, дехидрирао се употребом алкохола у различитим концентрацијама у узлазном редоследу. Последњи корак захтева да се ксилин или ксилен узорак разјасни.

Клизачи су условљени канадским балзамом или сличним који се посматрају под микроскопом.

Овом техником језгра су обојена црно, кост је зелено и хрскавица где су протеогликани црвени.

Мрља за идентификацију макроалги

Перез и остали су 2003. године предложили једноставну и јефтину технику бојења макроалги. Узорци се припремају у парафинским хистолошким пресецима. Одјељци су фиксирани са 1% глицерина, што им омогућава да се потпуно осуше. Затим се ставља у ксилол да би се уклонио парафин.

Одсек се рехидрише тако што се прође кроз серију посуда које садрже етанол у различитим степеном концентрације (силазни редослед), у трајању од по 2 мин у свакој.

Након тога, обојено је током 5 минута са 3: 1 мешавином 1% сафранина са 1% толуидин плаве боје, обе припремљене са 50% етанолом. У смешу се додају три капи пикричне киселине, која делује као благотворно.

Затим се дехидрира поновним проласком кроз посуде за алкохол, али овај пут узлазним путем. На крају се испере с ксилолом и узорак се припреми канадским балзамом који треба посматрати.

Токсичност

Срећом, сафранин је боја која не представља опасност за оне који са њим поступају. То је безопасна обојена боја, није канцерогена и није запаљива.

Директан контакт са кожом или слузницом може проузроковати мало црвенила у пределу, без већих компликација. Због тога се препоручује опрање погођеног подручја великом количином воде.

Референце

1. Гарциа Х. Цолоранте сафранина О. Техничар здравља, 2012; 1 (2): 83-85. Доступно на: медиграпхиц.цом
2. Гил М. Грам мрља: темељ, материјали, техника и употребе. 2019. Доступно на: лифедер.цом
3. Гил М. Бојење спора: образложење, технике и употребе. 2019. Доступно на: лифедер.цом
4. Сафранина. " Википедија, Слободна енциклопедија. 7 сеп 2017, 10:39 УТЦ 3 август 2019, 20:49 ен.википедиа.орг
5. Перез-Цортез С, Вера Б, Санцхез Ц. Корисна техника бојења у анатомској интерпретацији Грацилариопсис тенуифронс и Грацилариа цхиленсис (Рходопхита). Ацт Бот. Вене. 2003; 26 (2): 237-244. Доступно на: сциело.орг.
6. Црква Алеика, Пералта Естер Лилиа, Алварез Елба, Милиан Ј, Матос Мадиу. Однос функционалности ксилемских посуда и присуство Леифсониа кили субсп. кили. Заштита од поврћа 2007; 22 (1): 65-65. Доступно на: сциело.слд