БАКТЕРИЈСКА КУЛТУРА: ВРСТЕ, КАРАКТЕРИСТИКЕ, МЕТОДЕ, ЗАХТЕВИ - БИОЛОГИЈА - 2024

Бактеријска култура је резултат сетве ових микроорганизама на хранљивих подлога, како би они репродукују, што доводи до појаве бактеријских колонија у чврстим медијима и облачности у течним медијима.

Метода сејања је веома важна како би се могао дистрибуирати иноокулум на такав начин да се присутне бактерије распрше и могу да наставе правилно изоловане колоније.

Аутор је разне биљке засадио у лабораторији за бактериологију зграде Биомедицинске и технолошке науке, Универзитет у Карабобу. Извор: композиција фотографија које је снимио аутор МСц. Мариелса Гил.

Колоније добијене у чврстом медијуму културе последица су ширења микроорганизама који су засијани. Свака колонија полази од једне бактерије која се може експоненцијално множити тако да формира макроскопски видљиву популацију.

Исто се дешава и у течним медијима културе, али у овом случају раст бактерија примећује се замућеношћу.

Раст бактерија могућ је када изабрани медијум културе испуњава хранљиве и пХ услове неопходне за развој одређене бактерије. Поред тога, потребно је контролисати и друге променљиве, као што су температура, време инкубације, концентрација кисеоника, ЦО ₂ , између осталог.

Нису све бактеријске популације исте потребе, иако неке могу бити заједничке готово свима, као што је то што медијум садржи пептоне, такође је тачно да постоје и захтевнији микроорганизми који додатно захтевају и друге специфичне супстанце, које се називају факторима раста.

На пример, може се поменути да је неким хемофилима потребно присуство фактора Кс (хемин) и фактора В (НАД) да би расли.

Врсте бактеријских култура

Бактеријске културе могу бити полимикробне, чисте или мешовите.

Полимикробне бактеријске културе

Полимикробне културе су оне које потичу од сетве узорка са места са нормалном микробиотом у коме се такође може наћи одређени патоген.

Пример: када се развија култура бриса грла, може се наћи патоген попут Стрептоцоццус пиогенес, али пратиће га заједничка микробиота у том подручју.

У овом случају је неопходна добра линија за раст различитих врста бактерија које су присутне у изолацији.

Колонија која има карактеристике компатибилне са сојем Стрептоцоццус пиогенес биће пажљиво додиривана платинастом петљом и потом посађена у медију за нетакнуте културе и на тај начин ће добити чисту културу тог микроорганизма.

Из ове чисте културе могу се обавити сви тестови потребни за идентификацију бактерија.

Чиста бактеријска култура

Да би се микроорганизам ефикасно идентификовао, треба радити из чисте културе.

Чисте културе могу се добити као у претходном примеру ресесењем изоловане колоније полимикробне културе или када се посади узорак који долази из нормално стерилног места и постоји само један патоген (раст једног врста бактерија). Пример: када се ЦСФ семе од пацијента са бактеријским менингитисом.

Други начин је да се ресесисом из старе чисте културе добије обновљена чиста култура.

Мешане бактеријске културе

Ове културе су састављене од мешавине микроорганизама, онако како се јављају у природи. У неким индустријским процесима употреба мешовитих култура је погодна.

Може се добити обједињавањем неколико чистих култура, јер оне омогућавају проучавање међусобних веза бактерија.

Они су корисни, на пример, у разградњи ксенобиотика у индустријским отпадним водама, пошто делују као биоразградљиви агенси.

Карактеристике бактеријских култура

Морфолошке карактеристике колонија добијених у бактеријским културама могу бити веома различите.

Колоније могу бити врло мале, умерене или велике и могу се појавити суве или слузаве, сјајне или досадне. У зависности од текстуре, може варирати између глатке и грубе, а у зависности од облика могу бити кружне, равне, конвексне.

У зависности од боје могу бити: безбојна, бела, жута, ружичаста, фуксија, црвена, наранџаста, беж, сивкастозелена, зеленкаста, смеђа, црна или са металним сјајем, у зависности од бактерија и култура која се користи.

Границе колонија могу бити правилне или неправилне. Други, са друге стране, могу представити једноличан филм који је дистрибуиран у готово читавом медију који се назива "ројењем". Ово је карактеристично за Протеус сп.

Неке бактеријске културе емитују мирисе који су врло карактеристични за укључене врсте. На пример, култура Псеудомонас аеругиноса има карактеристичан мирис по воћу, док род Протеус има карактеристичан грозан мирис.

Примери колонија према њиховој величини

Изузетно мали: Мицопласма пнеумониае, Франциселла туларенсис.

Мале: Стрептоцоццус сп, Ентероцоццус сп.

Умерено: Породичне ентеробактерије

Велики: Бациллус цереус, Псеудомонас аеругиноса.

Пример колонија према њиховом изгледу

Суво: Лацтобациллус цонфусус.

Мукоиди: Клебсиелла пнеумониае, Псеудомонас аеругиноса.

Бриљантан: Клебсиелла пнеумониае.

Опакуе: Ентероцоццус фаецалис, неки сојеви бактерије Неиссериа гоноррхоеае.

Примери колонија према њиховој текстури

Глатке колоније: Мицроцоццус лутеус

Грубе колоније: Сарцина вентрицули на хранљивом агару.

Пример колонија према њиховом облику

Кружнице: Листериа мурраии и Мицроцоццус лутеус на хранљивом агару.

Стан: Стапхилоцоццус екуорум на хранљивом агару.

Конвекс: Стапхилоцоццус ауреус, Клебсиелла пнеумониае.

Пример колонија према њиховим границама

Заобљена ивица: Стапхилоцоццус ауреус, Есцхерицхиа цоли.

Неправилна граница: Клебсиелла пнеумониае, Псеудомонас аеругиноса.

Пресаване ивице: Бациллус сп.

Пример колонија према њиховој боји

Транспарентан или безбојан: Схигелла сп на КСЛД агару.

Бели: Стапхилоцоццус хоминис на крвном агару.

Беж: Бациллус спхаерицус и Лацтобациллус цонфусус на хранљивом агару.

Жуто: Стапхилоцоццус ауреус и Елизабетхкингиа менингосептица на крвном агару, Педиоцоццус сп, Стапхилоцоццус лентус на хранљивом агару,

Ружичаста: Есцхерицхиа цоли на КСЛД агару, Мицроцоццус росеус на хранљивом агару.

Фуксија: Есцхерицхиа цоли на Мац Цонкеи агару.

Љубичаста: Цхромобацтериум виолацеум.

Црвенкасто: Серратиа марцесценс на собној температури на хранљивом агару.

Наранџаста: Куртхиа зопфии на хранљивом агару.

Сивкаст: Споросарцина уреае у агару екстракта тла.

Зеленкасто: Псеудомонас аеругиноса на БХИ агару.

Смеђи: Ентероцоццус сп на жучном есцулинском агару.

Црна: Салмонелла ентеритидис на СС агару.

С металним сјајем: Есцхерицхиа цоли на ендо агару.

Методе бактеријске културе

Факултативна аеробна или анаеробна бактеријска култура

То је метода која се најчешће користи. То је због чињенице да је, на првом месту, већина бактерија патогених за човека аеробне или факултативне анаеробне; и друго, много је јефтинији и лакши од анаеробних култура. Пример: Мицопласма пнеумониае и Есцхерицхиа цоли.

Анаеробна бактеријска култура

Ова врста културе захтева потпуно сузбијање кисеоника. Медијуми за узимање анаеробних бактерија углавном требају садржавати редукционе материје као што су: аскорбинска киселина, тиогликолат, цистеин или сумпор да би се елиминисали токсични ефекти кисеоника из ваздуха.

Неки садрже показатеље попут ресазурина који је плаве боје у присуству кисеоника и безбојан у анаеробиози. Пример: Цлостридиум тетани.

Бактеријска култура у микроаерофилији

Плоче за културу су постављене у микроаерофилну хаубу са запаљеном свећом, покривене. Свијећа троши кисеоник и гаси се ван. У овом стању расту неке бактерије, као што је Стрептоцоццус сп.

Материјали и захтеви

материјали

Материјали потребни за обављање бактеријске културе су: Петријеве посуде или епрувете са медијумом или бујоном, платинаста петља, узорак, Бунсен горионик или рерна.

Захтеви за обављање културе бактерија

Бактеријска култура захтева много елемената које је потребно узети у обзир, попут хранљивих материја у медијуму, пХ, температуре, концентрације кисеоника, ЦО2, влаге, између осталог.

Хранљиви састојци

Бактеријским културама потребни су култури који садрже макроелементе и микроелементе. Међу макроелементима могу се поменути органске материје као што су пептони, аминокиселине, угљени хидрати као извори угљеника и азота.

Међу микроелементи спадају неорганске материје или елементи у траговима манган, цинк, никл, бор, хлор, селен, силицијум, кобалт, бакар.

Концентрација водоничног јона (пХ)

Концентрација водоничних јона (Х ⁺ ) и хидроксил јона (ОХ ^- ) у медијуму у коме ће се развијати култура је од виталног значаја, јер они одређују пХ.

ПХ који се најчешће користи је неутралан (пХ = 7,0), међутим може постојати начин где је кисели или алкални пХ погодан, на пример ако желите да изолирате ацидофилне или алкалипилне бактерије.

Температура

Температура је веома важан фактор који утиче на раст бактеријских култура. Бактерије могу бити психрофичне (расту на температурама <20 ° Ц, мезофилне (између 20 ° Ц и 42 ° Ц), термофилне (40 ° Ц до 70 ° Ц), хипертермофилне (70 ° Ц - 105 ° Ц).

Потреба кисеоника

Аеробни: расту у присуству кисеоника.

Микроаерофилни: расту у присуству 5-10% ЦО _2.

Строги анаероби: расту у недостатку кисеоника.

Факултативни анаероби: расту у присуству кисеоника или без њега.

Аеротолерант: добро расту без кисеоника и толеришу мало кисеоника.

Медиј културе

Медијуми за културу су посебни хранљиви препарати који се припремају у лабораторији за добијање микробног раста или културе. Ови медији се разликују по конзистентности, саставу и функцији. Свака лабораторија ће припремити врсту медијума за културу који одговара њиховим потребама.

Збирка бактеријске културе

Постоје установе или организације које су посвећене сакупљању, карактеризацији, одржавању и дистрибуцији бактеријских сојева клиничког, окружног или индустријског значаја.

Ови сојеви се користе за истраживачки рад и за вршење контроле квалитета на културним медијима.

Пример: сојеви америчке колекције култура типа, венецуелански центар за прикупљање микроорганизама (ЦВЦМ) и сојеви Националног института за хигијену, епидемиологију и микробиологију Кубе (ИНХЕМ), између осталих.

Референце

1. Бенавидес Г, Хермида А. Издвајање и идентификација аутохтоне бактеријске флоре из тла Цруз Верде и Гуасца парамос. (Цундинамарца). 2008. Богота. Доступно на: јавериана.еду.цо/библос
2. Ханс С. Општа микробиологија. Омега издања. 1991. Барселона, Шпанија. Доступно на: биолпроцариотас.филес
3. Венг З, Јунцо Р, Диаз Р. Збирка микробних култура: Белешке о њиховом развоју. Рев Кубана Хиг Епидемиол, 2003; 41 (1). Доступно на: сциело.слд.цу/сциело.
4. Конеман Е, Аллен С, Јанда В, Сцхрецкенбергер П, Винн В. (2004). Микробиолошка дијагноза. 5. изд. Редакција Панамерицана СА Аргентина.
5. Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. (2009). Баилеи & Сцотт Микробиолошка дијагноза. 12 ед. Редакција Панамерицана СА Аргентина.