КРВНИ БРИС: КАРАКТЕРИСТИКЕ, ВРСТЕ, ТЕХНИКЕ И ХИСТОЛОГИЈА - БИОЛОГИЈА - 2025

Размаз крви је периферне брис крви који се користи да анализира компоненте присутне у крвоток. Посматрање крвног бриса пружа хематолошке податке који су веома корисни за дијагнозу и праћење многих патологија.

Крвни преглед омогућава квантификацију броја различитих врста белих крвних зрнаца (леукоцитна формула), као и анализу морфологије и облика еритроцита, леукоцита и тромбоцита.

Припрема крвног бриса. Извор: Крв у лабораторијској чаши. Публиц ДомаинПицтурес.нет

У њему се могу открити абнормалности у броју ћелија, као што су: леукоцитоза или леукопенија, лимфоцитоза или лимфопенија, неутрофилија или неутропенија, тромбоцитоза или тромбоцитопеније и еозинофилија. Такође се могу видети неправилности у величини ћелије и облику.

Поред тога, могуће је открити разне врсте анемија, леукемије и бактеријске или крвне паразите.

За то постоје различите врсте бриса који се раде у зависности од сврхе испитивања. Постоје танки мрље и густи. Ови се мрље разликују у техници извођења и сврси студије.

Они са финим капи користе се као додатак комплетној хематологији. Ово даје податке о леукоцитној формули, поред анализе облика и морфологије три ћелијске серије које чине крв: црвене серије, беле серије и тромбоцити. Иако служе и као додатак проучавању дебелог крвног филма.

Дебели филм користи се за дијагностику болести изазваних хемопаразитима, као што су маларија или маларија, токсоплазмоза, лајманијаза, болест Цхагаса, бабесиоза и микрофиларијаза.

Карактеристике бриса крви

Добар брис крви мора бити у складу са одређеним карактеристикама. Међу њима можемо поменути:

-Узорак мора да испуњава минималне захтеве за квалитет да би био репрезентативан.

-Узорковање мора бити добро извршено.

- Правовремено извршавање бриса.

-Ако се ради са венском крвљу, користите антикоагуланс који не деформише ћелије и помешајте епрувету пре него што направите брис.

-Ако се ради капиларном крвљу, одбаците прву кап.

- Ширење мора бити хомогено. То осигурава да су ћелије равномерно распоређене и да ћелије крви могу бити добро анализиране према облику и броју.

-Страни размазивања требају бити глатки од почетка до краја.

-Мозиште мора бити у одељку од 1 до 2 мм од стране клизача.

- Слој размаза треба постепено да се смањује у дебљини од почетка до краја (размазује се финим капи методом клизања).

-То мора бити правилно означено да би се избегла конфузија узорака.

-Направите исправну мрљу и исправно је посматрајте крвне елементе.

-Оставите да се мрља добро осуши пре него што монтирате препарат под микроскоп. Стављање урањајућег уља на влажну мрљу узроковаће стварање мицела које спречавају да се ћелије виде.

Врсте бриса крви

Периферни бриси крви могу се класификовати у танке и густе. Они са танким слојем користе се за проучавање формуле леукоцита и морфолошко посматрање крвних ћелија. Између осталих могу се видети и ванћелијске бактерије као што су борелија и унутарћелијски хемопаразити, попут плазмодијума.

У финој мрљи могу се препознати врсте паразита, дакле, специфичнија је техника од густе мрље, али је дебела мрља осетљивија, јер је то метода концентрације која се користи за исцрпну потрагу за ванћелијским хемопаразитима.

Постоје две врсте финих капи: она која се изводе на слајдовима и она која се изводе на покривачима. Густе мрље се раде на тобоганима.

Технике узимања узорака крви

Крвни бриси могу се направити из капиларне пункције или венског узорка узетом антикоагулансом. Ако се ради из крви са антикоагулансом, мрља се може припремити до 2 сата након узимања узорка.

Треба бити опрезан да користите антикоагулансе који не деформишу крвне ћелије. Најбоља опција је ЕДТА. Супротно томе, треба избегавати употребу антикоагуланса као што је трисодријум цитрат.

Ако се узорак узме капиларном пункцијом, размаз треба одмах продужити, пре него што се крв створи.

Прву кап треба одбацити, омогућавајући следећој капи спонтано да избегне разблажење узорка течном ткивом. То је највише препоручена техника за посматрање ћелијске морфологије, јер крв нема адитива.

За посматрање хемопаразита, Солари и др. Закључили су у свом истраживачком раду да су обе технике (венепункција и капилара) подједнако ефикасне.

Врсте узорковања крви: А. Капиларна пункција. Б. венска пункција. Извор: А. Флицкр.цом Б. Пкхере.цом

Технике припреме бриса крви

Крв крви се може извршити ручно на дијапозитивима микроскопа или на поклопцу или клизачу. Могуће је и путем аутоматизоване опреме.

-Клизне мрље

То је техника коју већина лабораторија преферира због једноставног руковања.

Помоћу Пастерове пипете ставите не баш густу или врло фину кап крви у средину једног краја чистог тобогана.

Размаз се направи уз помоћ другог тобогана са уземљеним крајем. Клизач за брушење стакла постављен је окомито на супротни крај места где се кап налази.

Нагиње се до угла између 30 - 45 ° и клизи према паду; када се додирне, линеарно се шири преко ивице клизача и сталним и дефинисаним покретом листа се враћа; пре него што дођете до краја клизач се подиже.

На овај начин се хомогени слој распоређује по површини пријемног тобогана.

Пљачка се остави да се осуши. Затим је фиксиран и обојен пожељном мрљом. Пре гледања под микроскопом оставите да се добро осуши. Кап уља стави се на лице које показује брис и посматра се под светлосним микроскопом.

Крв на капљицу. Горња слика: неиспавани размаз. Доња слика: мрље. Извор: Цоинмац

Делови бриса направљени на слајдовима

Код ове врсте бриса могу се разликовати три дефинисана подручја: глава, тело и реп. Глава одговара пределу на коме почиње брис, то је најдебље подручје и није га добро посматрати.

Тело је централни или средњи део бриса, то је најбоље подручје које се посматра под микроскопом, јер су тамо ћелије равномерно распоређене и њихова морфологија је сачувана.

Реп одговара завршном делу бриса; овде дистрибуција више није једнолика и морфологија еритроцита има тенденцију губитка.

Контрола квалитета у техници слајда

У овој техници игра темељну улогу:

-Чишћење и одмашћивање клизача: гарантује добро клизање узорка.

-Величина капљица: са врло великим капи добит ће се дебљи и дужи размаз, а са врло малим капљицом намаз ће бити краћи и изузетно фин.

- Брзина примењена у продужетку: што је мања брзина, размаз ће бити тањи, што је већа и брзина.

-Угао извршавања: што је мањи угао финијег мрља то је већи угао дебљи.

- Пређите на покривач

Не користи се широко јер је руковање са крхким покривачима гломазно, али нуди велике предности, јер се бољом расподјелом ћелија добија у читавом брису.

У средину покривача налази се не баш густ, не баш фини кап. Одмах на ово се поставља други покривач на такав начин да се врхови оба покривача избоче, творећи звезду.

Кап ће се спонтано раширити по површини оба покривача. На крају продужетка, сваки клизач се брзо помиче на супротну страну (један десно, а други лево).

Техника омогућава два бриса уместо једног.

Постављају се да се осуше са раширеном страном према горе. Једном када се осуши, фиксира се и мрље техником избора. Пустите да се осуши. Кап уља урањања се стави на клизач, мрља се стави окренутим према доле и гледа под микроскопом.

Контрола квалитета у техници покривања

За постизање доброг размаза ове технике важно је:

-Чишћење покривача (помаже да се узорак глатко клизне).

- Величина капи (утиче на дебљину мрље).

- Брзина којом се раздвајају покривачи (утиче на хомогеност намаза).

-С аутоматизираном опремом

Могу се обавити преко било којег од ових тимова: Спиннер и Аутослиде.

Спиннер се састоји од постављања тобогана са капљицом крви на посебну плочу за центрифугу. Узорак се центрифугира великом брзином; на овај начин се формира хомоген и фини размаз узорка. Има недостатак могућности хемолизе узорка.

Аутослиде је инструмент који механички врши покрете за извођење бриса на тобоганима. Такође можете да поправите и обојите мрље. Може се прилагодити и неким аутоматским бројачима хематологије.

Техника густог размазивања

За претрагу хемопаразита препоручују се два бриса: један са фином капи и један са густом капљицом.

Извршите капиларну пункцију, очистите прву кап. Ставите фину кап на слајд и размажите како је раније објашњено. За дебелу куглу ставите велику перлу на други тобоган и раширите је на квадрат 1,55 мм. Оставите да се два мириса осуше.

Бојење мрља

Мрље од Гиемса или Вригхт, између осталог, могу се користити за фине капи. Гиемса или Маи-Грунвалд мрља Гиемса препоручује се код густих мрља.

Гиемса мрља

Смеће је фиксирано 3 минута метанолом, исушено и остављено да се поново осуши. Након тога се мрља прекрива Гиемса флеком 10-15 минута. Испран је дестилованом водом и остављен да се осуши. Да би се под микроскопом посматрало ставила се кап урањајућег уља.

Вригхт је мрља

Мрља је прекривена Вригхт-овом мрљом током 5 минута. Одбаците и ставите раствор пуфера на пХ 6,8 на 6 минута. Издувајте препарат да се хомогенизује. Оперите дестилираном водом и оставите да се осуши. Посматрајте под микроскопом.

Врсте неисправних бриса

Јавља се код полазника у техници финог испуштања помоћу тобогана.

Размазује се површинама различите дебљине (танке и густе испреплетене)

То је зато што кретање извршено није било константно током ширења, па су се заустављали и поново покретали.

Веома кратак размаз

Они имају 2 узрока: један је због чињенице да је клизач за земљу уздигнут пре него што дође до другог краја клизача. У овом случају је изузетно густа и кратка.

С друге стране, ако је мрља кратка, али танка, то је зато што је величина капи била врло мала.

Размажите побрашњеном подручју према крају бриса

Има неколико узрока: један је да је ивица тла неисправна, да се притисак на пријемном клизачу повећава у тренутку ширења или да се земљана ивица клизача истроши.

Мастите се стварањем вакуоле или очистите заобљене или елиптичне области

Настају због употребе масних мрља (слабо испраних и одмашћених).

Веома густе или врло танке мрље

Превелике капи створит ће врло густе мрље од почетка до краја и врло мале капи створит ће врло фине мрље.

Хистологија

Крвне ћелије могу се видети у брису крви. Међу њима су:

-Еритроцити или црвена крвна зрнца

Људска крв, еритроцити или црвена крвна зрнца и два бела крвна зрнца. Преузето и обрађено од: Виасцос. Ваше запажање је од највеће важности. На овом нивоу се могу открити анемија, таласемија, болест коштане сржи итд.

Број еритроцита или црвених крвних зрнаца је приближно 5 к 10 ⁶ мм3 код мушкараца и 4,5 к 10 ⁶ у жена. Црвена крвна зрнца су у облику биконкавних дискова, са централном физиолошком бледом. Могу се видети одвојено (нормално) или формирати рулове од хрпе (ненормално).

Смери такође показују поикилоцитозу (црвена крвна зрнца различитог облика), анизоцитозу (црвена крвна зрнца различитих величина), анисопоикилоцитозу (различитих облика и величина), анисохромију (различитих боја), еритробласте (незрела црвена крвна зрнца), микроцитозу (мања црвена крвна зрнца) ) и макроцити (већи еритроцити).

Када имају мањак количине хемоглобина и повећава се средишња бледица, каже се да постоји хипохромија. Када се примети нормална црвена серија, пријавиће се као нормоцитна и нормохромна.

-Беле крвне ћелије или леукоцити

бела крвна зрнца

Нормална количина се креће од 5.000 до 10.000 мм ³ . Они се мењају у заразним процесима, у алергијама и у леукемији. У размазу крви може се разликовати неколико типова, што је објашњено у даљем тексту.

Сегментирани неутрофили

Они представљају 55-65% укупних леукоцита. Они мере између 10-15 µм. Имају сегментирано или лобедово језгро које усваја различите морфологије, отуда се назива полиморфонуклеарно.

Имају обиље неутрофилних гранула у својој цитоплазми и нешто азурофила. Повећавају се бактеријске инфекције (неутрофилија), смањују вирусне инфекције (неутропенија).

Могу се приметити морфолошке абнормалности као што су плеокариоцитоза (хиперсегментирана језгра), лукови (незреле ћелије) или макрополици (овалног облика и велики).

Остале измјене:

-Токсичне гранулације

-Псеудо Пелгерови неутрофили (језгро не представља лобулације или су билобеде).

-Дохле тела: тамноплава цитоплазматска укључења.

-Појачана цитоплазматска базофилија.

-Инцератоплазматске вакуоле.

-Челијска пикноза (губитак међунуклеарних мостова).

Сегментирани еозинофили

Представљају 1-3% укупних белих крвних зрнаца. Они мере 9-10 µм. Карактерише их присуство обилних ацидофилних цитоплазматских гранула и неколико азурофила. Његово језгро има две лобулације. Њихов број се повећава код алергија и болести паразитског порекла.

Сегментирани базофили

Они су изузетно ретки, представљају 0-1% леукоцита. Они мере 10-12µм. Језгро је обично неправилних рубова и може бити билобелично, али се не примећује због великог броја базофилних грубих гранулација у његовој цитоплазми. Врло ретко се може видети базофилија.

Лимфоцити

Они су мале ћелије са базофилном цитоплазмом, са језгром, добро дефинисаним, округлим, са кондензованим хроматином. Језгро обухвата готово целу ћелију. Представљају 26-40% леукоцита у крви. Повећавају се вирусне инфекције (лимфоцитоза). Могу се видети реактивни лимфоцити.

Моноцити

Ћелије веће од лимфоцита, са већом цитоплазмом и лабавијим, овалним језграма хроматина. Они мере 9-12μм. Цитоплазма је обилна и обично се појављује бледо сивкасто плава са стандардним техникама бојења. Вакуоловани моноцити и моноцитоза могу се приметити међу изменама.

-Плателет

Они мере између 1,5-3 µм. Облик је округласт или ован. Нормална вредност креће се од 150 000 до 350 000 тромбоцита / мм3. Они могу да смање неке вирусне инфекције. Немају језгро и обојени су љубичасто. У овој серији могу бити уочене неправилности, попут макро или микро тромбоцита, тромбоцитоза или тромбоцитопенија и фрагменти тромбоцита.

Патолошки елементи

Крвни паразити

Хемопаразити, попут узрочника маларије или маларије (паразити рода Пласмодиум), могу се видети у крвним мрљама. Из тог разлога, важно је да се брис анализира ручно, јер аутоматизована опрема пропушта овај налаз.

Бактерије

Код патологија као што су рецидивна грозница или лајмска болест, може се приметити њен узрочник. У овом случају, то одговара Боррелиа рецурренти спироцхетес и Боррелиа бургдорфери у брису крви.

Незреле ћелије

Тешки случајеви су примећени, између осталих, леукемије, леукемоидне реакције и леукоеритробластичке реакције. Код бактеријских инфекција могу постојати мала одступања улево (присуство лопова). Еритробласти се такође могу видети у неким анемијама.

Референце

1. Крво и хематопоетско ткиво. Доступно на: слд.цу
2. Гомез А, Цасас М. 2014. Анђео. Клиничка лабораторијска интерпретација. 8тх Едитион. Уредништво Медица Панамерицана.
3. Солари Сото Л, Сото Таразона А, Мендоза Рекуена Д, Рачуни Лланос А. Поређење густине паразита у густом паду венске крви у односу на акупресуру у дијагнози Малариа вивак. Рев Мед Херед 2002; 13 (4): 140-143. Доступно на: сциело.орг.
4. Терри Леонард Нелсон, Мендоза Хернандез Царлос. Значај проучавања бриса периферне крви код старијих особа. Медисур 2017; 15 (3): 362-382. Доступно на: сциело.слд
5. Гринспан С. Студија бриса периферне крви. Континуирано медицинско образовање. Доступно на: бвс.хн/РМХ