СТУАРТ МЕДИЈУМ: ОСНОВА, ПРИПРЕМА И УПОТРЕБА - БИОЛОГИЈА - 2025

Медијум Стуарт је получврстог агар или чорба без хранљивих материја, који се користе за транспорт биолошких узорака. Његова сврха је да одржи сојеве присутне у узорку одрживим током одређеног времена, али без повећања микробне популације.

Направили су га Моффет, Иоунг и Стуарт 1948. године, а касније су га модификовали Тосхацх и Патсула. Састоји се од натријум-глицерофосфата, натријум-тиогликолата, калцијум-хлорида и агар-агара. Потоњи је присутан у получврстем медијуму и нема течности. Неке лабораторије додају метилен плаву боју.

Цултуретте са превозом Стуарт. Извор: Аутор: ЦДЦ / Др. Гилда Јонес, љубазношћу: Библиотека слика јавног здравља

Обично се користе када није могуће одмах сијати узорак. У овом случају, узорак се ставља у транспортни медијум, док се преноси у лабораторију која ће обрађивати културу.

На тај начин гарантовано је да присутни микроорганизми остану живи све док се не инокулишу у одговарајући медијум културе.

У почетку је његова употреба била намењена транспортовању уретралних или вагиналних узорака где се сумњало на присуство Неиссериа гоноррхоеае. Касније су схватили да би његова корисност могла бити и већа.

Медијум Стуарт показао се врло ефикасним у очувању лабилних и брзих микроорганизама попут Неиссериа менингитидис, Хаемопхилус инфлуензае, Стрептоцоццус пиогенес, Стрептоцоццус пнеумониае, Цоринебацтериум дипхтериае, Бордетелла пертусис, између осталих. Поред осталих немирних микроорганизама као што су Ентеробацтериа.

Стуарт медијум у основи спречава исушивање узорка, одржава осмотску равнотежу и чува микроорганизме на идеалном пХ. С друге стране, стратешки овај медијум не садржи храњиве материје, чиме спречава размножавање микроорганизама.

На тржишту постоје посебни узорци транспортних уређаја који садрже ово или друго превозно средство, које се назива цултуретте. Такође се могу припремити у лабораторији.

Основе

Сврха Стуарт начина превоза је да узорци буду што ближи оригиналном стању док се не обраде.

Натријум-глицерофосфат и калцијум хлорид су пуферски систем који делује одржавањем пХ и осмоларности.

У међувремену, натријум тиогликолат делује као редукционо средство, а у случају да садржи агар, даје му получврсту конзистенцију, да одложи оксигенацију медијума. Најзад, метилен плава је индикатор оксидације, односно детектује присуство кисеоника.

Полутврда подлога са редокс индикатором је идеална за превоз узорака код којих се сумња на присуство анаеробних бактерија.

Карактеристике превозних средстава

Стуарт медијум, као и сва превозна средства, испуњава одређене карактеристике, укључујући:

-Одржава одрживе микробне сојеве присутне без умножавања.

-Не садржи храњиве материје; Његова једињења имају за циљ одржавање узорка хидрираног, под одговарајућим условима пХ и осмоларности.

-Инхибира аутолизат неких осетљивих микроорганизама, као што је Пнеумокок.

-На употреба је привремена, не би требало предуго да се продужава.

Припрема

Полутврда Стуарт подлога са редок индикатором

Припрема код куће

Састојци

Натријум-глицерофосфат 10 гр

Натријум-тиогликолат 1,0 гр

Калцијум хлорид 0,1 гр

Метилен плава 0.002 гр

Агар-агар 3 гр

Дестилована вода 1 Л

Мешајте компоненте и загревајте док се потпуно не растопе. Сипајте у епрувете или посебне брисове. Уводе се у аутоклав и стерилишу на 121 ° Ц током 15 минута. Оставите да се цеви вертикално охладе (у облику блока). Чувајте на собној температури.

Припрема са комерцијалним медијумом

Измери се 14,1 г медијума у ​​1 литру дестиловане воде. Често се трести док се потпуно не отопи, може се прокухати. Остатак поступка као што је већ описано.

Дехидрирани медијум је крем боје и припремљени треба бити плаве боје на својој површини. То је због присуства метилен плаве боје.

ПХ медијума мора да се подеси на 7,4 ± 0,2

Текуће модификована средње течна (домаћа)

Састојци

Натријум-глицерофосфат 10 гр

Натријум-тиогликолат 1 гр

Калцијум хлорид дихидрат 0,1 гр

Дестилована вода 1000 мл

Има исте састојке као и полутврда, али нема агар или метилен плаву боју. У овом случају, компоненте се мешају без загревања и 0,5 мл се дистрибуира у епрувете димензија 16 к 125 мм са вијчаним капама.

Стерилизира се у аутоклаву на 121 ° Ц током 10 минута. За узимање узорака треба користити дакрон брисеве ако је узорак за ПЦР или рајон ако је за културу.

Епрувете се чувају на собној температури.

Апликације

Комерцијално постоје посебни уређаји за превоз узорака који се називају цултуретте; Овај уређај је издужена танка цев која има тампон унутра, а на крају је сегмент који садржи получврсти или течни Стуарт медијум.

Уређај се отвори и узорак се узме брисом. Затим се враћа у цев све док врх тампона не буде убачен у получврсти транспортни медијум; Неки доносе полиуретанску спужву импрегнирану течним Стуарт средством, којом се узорак чува када се одржава мокрим.

У случају да се сумња на присуство осетљивих микроорганизама, за прикупљање узорка треба користити памучне брисеве са дрвеним угљем.

Узорци који се могу узети брисом или брисом и пренети у овом медијуму су фарингеални ексудати, ректални бриси и разне секреције, укључујући: вагинални, уретрални, рани, окуларни, ушни и апсцес.

Током преношења узорка у транспортном медијуму у лабораторију, мора се избегавати излагање екстремним околним условима (превише хладно или претопло). Нагле промене атмосферског притиска такође би требало избегавати.

Време у којем је медиј способан да одржи микроорганизам одрживим зависиће од соја о коме је реч. На пример, за микроорганизме рода Неиссериас и Хаемопхилус могу остати одрживи до 24 сата, али сојеви попут Салмонелла или Схигелла могу трајати данима, па чак и недељама.

Ако се процени да обрада узорка може трајати више од 4 дана, пожељно је да се узорак замрзне на -70 ° Ц.

Идентификација узорка у превозном средству

Припремљено превозно средство или комерцијална култура морају имати етикету на којој ће се налазити следеће информације:

Име и презиме пацијента: избегава забуну узорака.

Идентификациони број: згодно је водити наруџбу на послу.

Извор за прикупљање узорака: помаже бактериологу да одабере одговарајући медијум за културу.

Гостујући доктор: Понекад је потребно за могуће консултације.

Датум и време узимања узорка: потребно је за прихватање или одбијање узорка према времену које је протекло између узимања узорка и пријема у лабораторију.

Остале информације које би биле корисне у прилогу су:

Претпостављена дијагноза: води додавање посебних култура у складу са сумњивом дијагнозом.

Лечење антибиотицима: корисно је додати се у антибиограм.

Све ове информације су од виталног значаја за осигуравање правилне обраде узорака.

КА

За процену перформанси Стуарт медијума, познати сојеви се могу инокулирати и држати на 25 ° Ц, као што су: Бордетелла пертуссис АТЦЦ 9340, Хаемопхилус инфлуензае АТЦЦ 19418, Неиссериа гоноррхоеае АТЦЦ 19424, Неиссериа менингитидис АТЦЦ 13090, Стрептоцоццус пнеумониае АТЦЦ 630.

У свим случајевима се очекује да ће опоравак дотичног микроорганизма сачувати 24 сата.

С друге стране, могу се користити и други сојеви као што су: Схигелла флекнери АТЦЦ 12022, Стапхилоцоццус ауреус АТЦЦ 6538, Стрептоцоццус пиогенес АТЦЦ 12344, Ентероцоццус фаецалис АТЦЦ 33186, Псеудомонас аеругиноса АТЦЦ 27853 и Есцхерицхиа цоли АТЦЦ 11775.

У свим случајевима се очекује обилно опорављање до 96 сати.

Ограничења

Неке студије потврђују да се глицерофосфат присутан у Стуарт медијуму може метаболизирати неким колоформима, између осталих грам-негативним бактеријама, и стога се размножавати у овом медијуму.

Овај ризик се повећава што дуже одлагање обраде узорака. Исто тако, изложеност Стуарт-ове средње температуре високим температурама током транспорта утиче на то.

Референце

1. „Медијум транспорта (микробиологија).“ Википедија, Слободна енциклопедија. 13 апр 2018, 10:36 УТЦ 1. априла 2019. Доступно на: ес.википедиа.орг
2. Мицрокит Лабораториес: Медији културе. Стуарт Транспортатион. Доступно на: Доступно на: Медиосцултиво.цом
3. ЛабЛисан. Стјуартова превозна средства. Доступно на: лаблинсан.цл
4. Научни МДМ. Предности употребе Стуарт микробиолошког транспортног медијума. Доступно на: мдмциентифица.цом
5. Метрик Лабораториес. Стуарт. 2017. Доступно на: метриклаб.мк
6. Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. (2009). Баилеи & Сцотт Микробиолошка дијагноза. 12 ед. Редакција Панамерицана СА Аргентина.
7. Конеман Е, Аллен С, Јанда В, Сцхрецкенбергер П, Винн В. (2004). Микробиолошка дијагноза. 5. изд. Редакција Панамерицана СА Аргентина.