- Боје које се користе у једноставном бојењу
- Шест корака до једноставног бојења
- Корак 1
- Посматрање
- Корак 2
- Посматрање
- 3. корак
- 4. корак
- Посматрање
- Корак 5
- Референце
Један бојење је бојење поступак брз и једноставан у којем се користи једна боја, тако да се зове једноставно. Користи се углавном за одређивање морфологије и организације ћелија присутних у узорку.
Ћелије су природно безбојне, па их је потребно учинити на неки начин видљивим када се посматрају под микроскопом.
Ћелије људског образа обојене једноставним бојењем метилен плавим.
Важно је напоменути да боје које се користе при једноставном бојању морају бити базичне са позитивним набојем (катионским), тако да се могу спонтано везати за ћелијску стијенку и цитоплазму.
Ове ћелијске структуре су негативно наелектрисане. Због тога се позитивно набијена боја привлачи ћелијама и спонтано се веже за њих. Тако се све ћелије присутне у узорку брзо обоје.
Боје које се користе у једноставном бојењу
Постоји неколико основних мрља које се могу користити у микробиолошкој лабораторији. Најчешће се користе:
- Метилен плаво.
- Кристална љубичица.
- Малахит зелено.
- Основни фуксин.
Све ове боје добро делују у бактеријама јер имају позитивно наелектрисане (катионске) јоне у боји (хромофоре).
Време бојења за већину ових мрља је релативно кратко. Обично се крећу од 30 секунди до 2 минута, у зависности од афинитета боје.
Важно је имати на уму да се пре бојења узорка једноставним бојењем мора продужити и причврстити на стаклену летвицу (клизач); продужени и фиксирани узорак назива се брис.
Шест корака до једноставног бојења
Корак 1
Поставите тобоган на сталак за бојење и нанесите жељену мрљу. Нека одговарајуће време делује.
Обично једноставно бојање траје од неколико секунди до неколико минута, зависно од боје која се користи.
Посматрање
У овом кораку важно је не прекорачити препоручено време за коришћено бојило, јер се на листу могу формирати кристали, производећи оно што је познато као "артефакти" који искривљавају морфологију ћелија.
Корак 2
Темељито исперите мрље са тобогана дестилованом водом из боце или такође споро течном водом из славине, све док отпад не постане чист. Обично то траје 5-10 секунди.
Посматрање
Не наносите млаз воде директно на мрљу да не би дошло до тога да сила исте оштети узорак.
Ако немате дестиловану воду, без проблема можете да користите воду из славине јер то неће утицати на резултат бојења.
3. корак
Клизните клизач упијајућим папирним пешкиром у једном смеру и без трљања. Уверите се да је доња страна клизача чиста.
4. корак
Проматрајте мрље под микроскопом. Започните са најудаљенијим циљевима да исправно лоцирате подручје које желите детаљније посматрати. Промените циљ да бисте се приближили узорку и приближили га.
Посматрање
За употребу циља са већим увећањем (обично 100Кс) треба користити уље за урањање јер то помаже светлости да боље продре а слика да буде оштрија. Није неопходно користити покривач.
Корак 5
На крају, све узорке одложите у одговарајући контејнер који је правилно означен са "биолошку опасност".
Референце
- (2001). Микробиолошка Апликације: Лаборатори Мануал ин општу микробиолошке (8 тис ед.). Компаније МцГрав-Хилл.
- Харисха, С. (2006). Увод у практичну биотехнологију (1. ст. ). Медиа Фиревалл.
- Моиес, РБ, Реинолдс, Ј., и Бреаквелл, ДП (2009). Прелиминарно бојење бактерија: Једноставне мрље. Тренутни протоколи у микробиологији (СУППЛ. 15), 1–5.
- Поммервилле, Ј. (2013). Алцамо је Основи микробиолошке лабораторије (10 -ог ). Јонес и Бартлетт учење.
- Пресцотт, Х. (2002). Лабораторијске вежбе из микробиологије (5. мј. ) Компаније МцГрав-Хилл.
- Сумбали, Г. и Мехротра, Р. (2009). Принципи микробиологије (1 ст ). Тата МцГрав-Хилл образовање.