МАЦЦОНКЕИ АГАР: ОБРАЗЛОЖЕЊЕ, ПРИПРЕМА И УПОТРЕБА - БИОЛОГИЈА - 2025

МацЦонкеи агар је добар медиј који омогућава ексклузивни изолацију Грам негативних бактерија. Из тог разлога, он је селективни медијум и такође омогућава разлику између ферментације лактозе и не-ферментисаних бацила, што га чини диференцијалним медијумом. То је један од најчешће коришћених култура у лабораторији за микробиологију.

Овај медијум се углавном користи за изоловање грам-негативних бацила који припадају породици Ентеробацтериацеае, укључујући опортунистичке и ентеропатогене врсте.

МацЦонкеи агар засијан је с двије врсте бактерија. Леве бочне колоније за ферментацију лактозе, десне стране не-лактозне ферментацијске колоније.

Такође се може користити за изоловање других ентеричких бацила који живе у гастроинтестиналном тракту, али не припадају Ентеробацтериацеае, попут Аеромонас сп, Плесиомонас сп, између осталих.

Коначно, може изоловати друге грам-негативне бациле који не ферментирају глукозу и који се налазе у околини, води или тлу, али то понекад могу бити опортунистички патогени као што су Псеудомонас сп, Ацинетобацтер сп, Алцалигенес сп, Цхромобацтериум виолацеум, Стенотропхомонас малтопхилиа, између осталих.

Основе

МацЦонкеи агар

Основа овог медијума може се објаснити описом његових компоненти, јер сваки од њих има сврху која одређује његово својство.

Жучне соли и кристално љубичица

У том смислу, МацЦонкеи агар има сложен састав. Пре свега, садржи жучне соли и кристално љубичасту боју.

Ови елементи су одговорни за инхибирање раста грам-позитивних бактерија и неких брзих грам-негативних бацила. Заузврат, фаворизује развој грам негативних бацила на које ове материје не утичу. Стога је селективни медиј.

Кажу да је лагано селективан у поређењу с другим медијумима који такође инхибирају раст грам-позитивних бактерија и већине грам-негативних бактерија.

Пептони, полипектони и лактоза

Садржи супстанце које обезбеђују потребне храњиве материје микроорганизмима који се развијају у овом окружењу, као што су пептони, полипектони и лактоза.

Лактоза је кључна тачка да медијум буде диференцијални медијум, јер ће микроорганизми који имају способност ферментације лактозе развити јаке ружичасте колоније.

Неке бактерије могу ферментирати лактозу полако или слабо, развијајући бледо ружичасте колоније и остати лактозно позитивне.

Они који не ферментирају лактозу користе пептоне као извор енергије, производећи амонијак, алкалишући медијум. Из тог разлога колоније које потичу су безбојне или провидне.

ПХ индикатор

Промјена боје се постиже кроз друго битно једињење које има МацЦонкеи агар. Ово једињење је показатељ пХ, који је у овом случају неутрално црвене боје.

Ферментација лактозе ствара производњу мешовитих киселина. Кисели медијум до пХ испод 6,8.

То узрокује да се пХ индикатор окрене према тамно ружичастој нијанси. Интензитет боје може варирати у зависности од крајњег пХ.

Дестилована вода, натријум хлорид и агар

С друге стране, садржи дестиловану воду и натријум хлорид који дају средњој хидратацији и осмотској равнотежи. Коначно, медијум садржи агар, који је база која обезбеђује конзистенцију чврстог медијума.

Припремљени МацЦонкеи агар медијум треба да има крајњи пХ подешен на 7,1 ± 0,2.

Припрема

За један литар МацЦонкеи агара 50 г дехидрираног медијума мора се извагати, затим ставити у тиквицу и растворити у литру дестиловане воде. После 10 минута стајања греје се, непрестано мешајући до кључања током 1 минута.

Тиквица се затим стави у аутоклав и стерилисе на 121 ° Ц током 20 минута. На крају времена уклања се из аутоклава и оставља да се охлади док не достигне температуру од 45 ° Ц, да би се касније сервирао у стерилним Петријевим посудама унутар поклопца за ламинарни проток или испред Бунсеновог горионика.

Оставите да се очврсне и чувајте у обрнутом држачу за тањире и ставите у фрижидер на 2-8 ° Ц до употребе.

Да би се добио МацЦонкеи агар који инхибира ефекат померања произведен од стране Протеус рода, користи се МацЦонкеи агар са мало соли.

Употреба конвенционалног МацЦонкеи агара

МацЦонкеи Агар је укључен у све сетове медијума за културу уређене за сјетву клиничких узорака примљених у лабораторију. Такође је корисна у микробиологији хране и микробиологији животне средине.

Разноликост грам-негативних шипки које расту у овом медију изражавају фенотипске карактеристике које помажу у постављању претпостављене дијагнозе о дотичној врсти. На пример, величина, боја, конзистенција и мирис колонија, неке су од карактеристика које могу да усмере.

У овом медијуму врсте Есцхерицхиа цоли, Клебсиелла сп и Ентеробацтер сп стварају јаке ружичасте колоније, окружене зоном преципитиране жучи.

Док се бактерије попут Цитробацтер сп, Провиденциа сп, Серратиа сп и Хафниа сп могу појавити безбојне после 24 сата или бледо розе током 24 -48 сати.

Исто тако, родови Протеус, Едвадсиелла, Салмонелла и Схигелла производе безбојне или прозирне колоније.

Остале варијанте МацЦонкеи агара

Постоје и друге варијанте МацЦонкеи Агара које имају одређене сврхе. Они су наведени у наставку:

МацЦонкеи агар са сорбитом

Овај медијум је дизајниран да разликује ентеропатогени сој (ентерохеморагични Есцхерицхиа цоли О157: Х7) од остатка сојева Есцхерицхиа цоли.

Овај медијум замењује угљени хидрат лактозу за сорбитол. Ентерохеморагични сојеви Е. цоли О157: Х7 се разликују од осталих по томе што не ферментирају сорбитол и због тога се добијају прозирне колоније, док остатак врсте Е. цоли ферментира сорбитол а колоније су јако ружичасте.

МацЦонкеи агар без кристалне љубичице, нити соли

Овај агар се увелике разликује од класичног МацЦонкеи агара, јер нема љубичасти кристал и грам-позитивне бактерије могу расти.

С друге стране, одсуство соли инхибира појаву ројања на агару произведеном неким ентеричким бацилима, попут оних из рода Протеус, и на тај начин олакшава изолацију свих присутних бактерија, укључујући и Грам позитивне бактерије.

МацЦонкеи агар са цефоперазоном

Ова МацЦонкеи Агар варијанта дизајнирана је за почетно изоловање Ларибацтер хонгконгенсис, а касније је откривено да је корисно за изолацију Арцобацтер бутзлери-ја. Обе су благо закривљене Грам негативне шипке отпорне на цефоперазон.

Те бактерије су недавно повезане у узроковању гастроентеритиса и дијареје код азијских и европских појединаца, појављују се као два снажна патогена у настајању.

Антибиотик омогућава инхибицију пратеће флоре гастроинтестиналног тракта, што погодује развоју ових бактерија, спречавајући их да прођу непримећено, јер им је потребно 72 сата да расту.

МацЦонкеи агар припремљен са морском водом при 10% в / в

Ова варијанта је корисна за процену бактеријских санитарних показатеља фекалне контаминације, укључујући укупне колиформе и фекалне колиформе у рекреативним сланим водама (плажама и заливима).

Цортез и др. Из 2013. показали су да препарат припремљен на овај начин значајно повећава опоравак ових микроорганизама у сланом окружењу, у поређењу са употребом МацЦонкеи агара припремљеног са дестилованом водом.

То је због чињенице да модификовани медијум стимулише раст бактерија које су физиолошки у стању латенције „одрживе, али не и култивирајуће“, па их није могуће обновити у конвенционалним медијима.

Референце

1. Лау СК, Воо ПЦ, Хуи ВТ и др. Употреба цефоперазонског МацЦонкеи агара за селективну изолацију Ларибацтер хонгконгенсис. Ј Цлин Мицробиол. 2003; 41 (10): 4839-41.
2. МацЦонкеи агар. Википедија, Слободна енциклопедија. 4 апр 2018, 18:16 УТЦ 29 децембар 2018, 15:22 ен.википедиа.орг
3. Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. (2009). Баилеи & Сцотт Микробиолошка дијагноза. 12 ед. Аргентина. Редакција Панамерицана СА
4. Конеман Е, Аллен С, Јанда В, Сцхрецкенбергер П, Винн В. (2004). Микробиолошка дијагноза. (5. изд.). Аргентина, уредништво Панамерицана СА
5. Цортез Ј, Руиз И, Медина Л, Валбуена О. Утицај медијских култура припремљених уз морску воду на здравствене показатеље у морским водама бања у Цхицхиривицхе, држава Фалцон, Венезуела. Рев Соц Вен Мицробиол 2013; 33: 122-128
6. Гарциа П, Паредес Ф, Фернандез дел Баррио М. (1994). Практична клиничка микробиологија. Универзитет у Кадизу, друго издање. УЦА Публицатион Сервице.