Агар манитол со или манитол со је чврста средње селективног и диференцијал културе. Створио га је Цхапман за изолацију патогених грам-позитивних кока, посебно Стапхилоцоццус ауреус.
Међутим, такође је корисно издвојити Стапхилоцоцус епидермидис, који понекад може бити присутан као опортунистички патоген, и Стапхилоцоццус сапропхитицус, препознати мокраћни патоген, између осталих врста.
А. Фиола са припремљеним сланим манитол агар средством. Б. Плоче сланог манитовог агара засијане ферментирајућим и не-ферментирајућим бактеријским сојевима манитола. Извор: А и Б: Фотографије снимио аутор МСц. Мариелса Гил.
Неки ентерококи су способни да расту на овом медијуму, као и одређени Грам-позитивни штапови за формирање спора.
Овај медијум је веома користан у анализи клиничких узорака, али се такође користи у микробиолошкој студији хране и контроли квалитета индустријских производа, попут козметике, лекова, између осталог.
Слани манитол-агар састоји се од екстракта и пептона из говедине, триптеина, манитола, натријум-хлорида, фенола црвеног и агара.
Основе
Манитол агар је селективан захваљујући високој концентрацији соли. Сланост делује као инхибиторна супстанца и спречава раст Грам негативних бактерија.
Такође је различит због присуства угљених хидрата манитола и фенол црвеног пХ индикатора. Из тога бактерије које могу ферментирати манитол стварају киселине, закисељујуће медијум, претварајући колоније и средину у жуту.
С друге стране, колоније које не ферментирају манитол расту у медијуму узимајући храњиве састојке које добијају екстракти и пептони меса и триптеина. Одатле бактерије извлаче угљен, азот, витамине и минерале потребне за њихов раст.
Колоније у овом случају могу бити слабе или јаке ружичасте боје, а медиј остаје исте боје или се мења у фуксију.
Агар је супстанца која даје конзистенцију медијуму.
Припрема
Да бисте припремили литар сланог манитарског агара, измеримо 111 г дехидрираног медијума префериране комерцијалне компаније и растворимо у 1000 мл дестиловане воде, користећи тиквицу.
Топлота се примењује уз често мешање медијума да би се побољшао процес растварања. Прокухајте минут.
Тиквица се постави у аутоклав на 121 ° Ц током 15 минута.
На крају времена извадите бочицу из аутоклава, оставите је да се одмори и послужите између 15 и 20 мл на стерилним Петријевим посудама када је температура приближно 50 до 55 ° Ц.
Дозвољено је очвршћавање, наручивање на обрнути начин у плочама и чување у фрижидеру до употребе. Пре сетве узорка, сачекајте да плоча достигне собну температуру.
Плоче се сјеме стружењем или површинским сетвом дригалски лопатицом. Коначни пХ припремљеног медијума мора бити 7,4 ± 0,2
Боја дехидрираног медијума је светло беж, а боја припремљеног медијума је наранџасто црвена.
Апликације
Због високе селективности, овај медијум је идеалан за сјетву узорака са мијешаном флором у којима желите потражити присуство Стапхилоцоцус ауреус, као главног патогена овог рода.
У том смислу, једна од његових најчешћих примена је у микробиолошкој анализи фарингеалних ексудата и узорака из носа, посебно за откривање асимптоматских носача С. ауреус.
Неке земље су ову анализу спровеле као обавезан услов за људе који желе да раде као продавци хране.
Ова контрола спречава уговарање људи који су носиоци С. ауреус, чиме се избегава велико тровање храном, услед конзумирања хране контаминиране стафилококним ентеротоксином.
Такође се може укључити у сетву раних инфекција, крвних култура, ЦСФ-а, бронхоалвеоларног испирања, између осталог.
Слани манитолни агар је користан за поновну изолацију колонија из уринарних култура из ЦЛЕД агара или крвног агара чији је Грам открио кластериране Грам позитивне коке.
Такође важи за микробиолошку анализу хране, питке воде, тла, између осталих примена.
КА
Једном када је припремљена серија плоча са сланим манитолним агарима, препоручљиво је извршити контролу квалитета. Контролни сојеви се посеју да би се показало да ли постоји раст или не.
Познати сојеви Стапхилоцоццус ауреус могу се користити као позитивна контрола. Требало би да расте задовољавајуће, развијајући жуте колоније, а медијум такође претвара исту боју.
Исто тако, прикладно је укључити познати сој Стапхилоцоццус епидермидис. Требало би да расте задовољавајуће, развијајући се ружичасте колоније, а средина остаје исте боје или потамни до јаче ружичасте.
Као негативна контрола користе се сојеви који на овом медију не би требало да расту. На пример, може се узгајати познати сој Есцхерицхиа цоли или Клебсиелла пнеумониае. Очекивани резултат је потпуна инхибиција, односно без раста.
Поред тога, неинокулирана плоча се мора инкубирати. У њему не би требало бити раста или промене боје.
Важно је да се плоча не користи ако постоје знакови пропадања, попут онечишћења, дехидратације, дисколорације, између осталог.
Последње мисли
Када користите мед за слани манитол агар, има неколико важних аспеката:
- Добивање пораста жутих колонија не значи да је реч о Стапхилоцоццус ауреус. Треба имати на уму да су неки сојеви Ентероцоццус-а способни да расту у овом медијуму и ферментацијом манитола, као и одређени Грам-позитивни штапови који стварају споре.
Због тога је важно извршити Грам на колонији и тест на каталазу.
-С друге стране, мора се сматрати да су и друге врсте стафилокока, осим ауреуса, способне ферментирати манитол. Због тога је важно субкултурати колонију хранљивом махуном да би се однео од ње и извршио тест коагулазе.
Међу врсте стафилокока клиничког значаја за човека који ферментирају манитол су: С. ауреус, С. симуланс, С. цапитис ссп цапитис, С. цапитис ссп уреалитицус, С. килосус, С. цохнии ссп уреалитицум, између осталих.
Други могу да дају променљиве реакције, то јест понекад позитивне, а понекад негативне. Неки су С. сапропхитицус, С. хаемолитицус, С. варнери, С. интермедиус, између осталих.
-Не препоручује се узимање колонија директно из манитовог агара како би се извршио тест коагулазе јер висока концентрација соли у медијуму може да омета резултат.
-На крају, препоручује се инкубација плоча засађених сланим манитолом до 48 сати, јер неки сојеви С. ауреус могу полако ферментирати манитол, иако то није често.
Референце
- Британниа Лабораториес. Слани манитол агар. 2015. Доступно на: британиалаб.цом
- "Слани манитол агар". Википедија, Слободна енциклопедија. 1 сеп 2018, 19:08 УТЦ 17. јануар 2019, 20:55, доступно на: ес.википедиа.орг.
- Конеман Е, Аллен С, Јанда В, Сцхрецкенбергер П, Винн В. (2004). Микробиолошка дијагноза. (5. изд.). Аргентина, уредништво Панамерицана СА
- Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. (2009). Баилеи & Сцотт Микробиолошка дијагноза. 12 ед. Аргентина. Редакција Панамерицана СА
- БД Лабораториес. БД манитол солни агар. 2013. Доступно на: бд.цом.