Бизмут сулфит агар је чврста средње селективан и диференцијал културе, специјално формулисан за изолацију Салмонелла ентерица подврста ентерица серотипа Типхи, поред других врста Салмонелла. Медијум је познат као БСА агар по својој кратици на енглеском Бисмутх Сулфите Агар.
Оригиналну формулу за бизмут сулфит агар створили су 1927. године Вилсон и Блаир (Глукозни бизмут сулфит гвоздени медијум); садржао је натријум сулфит, глукозу, раствор бизмута, амонијум цитрат, железов сулфат и агар-агар.
Раст од 48 сати инкубације Салмонелла сп на бизмут сулфит агару. Извор: Пикнио.цом Аутор: Др ВР Ервинг, УСЦДЦП
Данас постоји модификација оригиналног медијума, састављеног од екстракта меса, месних и казеинских пептона, индикатора бизмут сулфита, глукозе, динатријум-фосфата, железовог сулфата, јарко зелене боје и агар-агарја.
Постоји много средстава за изолацију врста салмонеле, али када је у питању опоравак серотипа Типхија, бизмут сулфит агар има значајну предност у односу на њих, јер је у већини веома мали или никакав опоравак овог микроорганизма .
Међутим, потребно је користити више врста медијума када покушавате да изолите ентеропатогене, јер је агар бизмут-сулфита мање ефикасан за друге врсте салмонеле и за род Схигелла, који су инхибирани или се развијају веома слабо. у овом агару.
Треба напоменути да је од свих врста салмонеле, серотип Типхија један од најважнијих ентеропатогена у човека, и то је његов једини резервоар. Овај серовар изазива тифусну грозницу, гастроентеритис, бактеремију и септикемију.
Из тог разлога је релевантно укључити овај агар приликом анализе воде, измета или узорака хране тамо где се сумња на његово присуство.
Основе
Као и већина медија културе, бизмут сулфитни агар садржи хранљиве састојке за подстицање раста бактерија, као што су пептони и екстракт меса. Исто тако, глукоза функционише као извор енергије и угљеника.
Међутим, неће све бактерије расти на овом медијуму, јер је бизмут сулфитни агар селективни медијум. Садржи једињења која инхибирају раст грам-позитивних микроорганизама и одређених грам негативних бактерија. Ова једињења су: индикатски бизмут сулфит и јарко зелена.
С своје стране, динатријум фосфат одржава осмоларност и пХ медијума.
Додатно, бизмут сулфит агар ис а диференцијални средња захваљујући присуству црне сулфата, што показује формирање Х 2 С. Тхе Х 2 С образује бактеријама реагује феро-сулфата и образује видљиво нерастворни црног талога.
Коначно, агар-агар даје чврсту конзистенцију медијуму.
Припрема
Извагати 52,3 г дехидрираног медијума и растворити у литру воде. Загревати смешу да кључа 1 минут уз често мешање, док се потпуно не отопи. Не прегревајте се превише. Овај медијум није аутокласиван, јер екстремна топлота оштећује медијум за културу.
Оставити на 45 ° Ц и протрести пре послуживања у стерилним Петријевим посудама. Препоручује се израда плоча добре дебљине. Да бисте то учинили, у сваку посуду мора сипати 25 мл. Пустите да се учврсти. Како се ради о медијуму који није стерилисан, нормално је да се сугерише његова тренутна употреба.
Међутим, истраживање спроведено од стране Д'аоуста 1977. године, показало је да постоји бољи опоравак Салмонелла типхимуриум и Салмонелла ентеритидис као средњег старења бизмут сулфит агара, што не утиче на перформансе серовара Типхи и Паратиипхи Б.
Д'аоуст препоручује да се тањири користе на хладном дану 4, мада упозорава да се, како средња старост, селективност смањује, а сојеви Протеус вулгарис лакше развијају.
Из тог разлога, за високо контаминиране узорке, као што је измет, пожељно је користити свеже припремљен медијум. У супротном користите 4. дан од његове припреме. Остали аутори препоручују употребу тањира дан након припреме, који су чувани у фрижидеру.
Охлађене плоче морају се темперирати прије употребе. ПХ медијума треба да буде 7,5 ± 0,2. Сирови медијум је беж, а припремљени медијум је зеленкасто-сив, опалесцентан.
Апликације
Међу узорцима који се могу засадити у овом медијуму су узорци фекалија, питке или отпадне воде и хране.
Да би се побољшали изолати, препоручује се спровести третман пре обогаћивања бујоном лактозе и после обогаћивања с бујоном тетратионата или цистин селенита, пре сетве на бизамут сулфит агар.
Плоче се инкубирају на 35 ° Ц ± 0,2 током 24 до 48 сати, у аеробиози.
Карактеристике колонија на аграму бизмут сулфита
Колоније салмонеле типике обично се виде на овом агару у року од 24 сата са црним центром и окружени су јарко зеленим ореолом. Док за 48 сати постају потпуно црне због стварања водоник сулфида.
-Ова средина инхибира већину врста рода Схигелла.
- С. Типхи и С. аризонае могу дати врло сличне колоније.
-Тхе колиформи које производе Х 2 С попут Протеус и Цитробацтер да производе колонија сличним онима салмонеле, па је потребно извршити биохемијским тестовима идентификације.
-Добро стренирање треба да се добије изоловане колоније; То је једини начин да се посматрају типичне карактеристике колонија рода Салмонелла.
КА
За контролу стерилности, неинокулирана плоча се инкубира на 37 ° Ц, очекује се да неће доћи до раста или промене боје.
За контролу квалитета познати сојеви као што су:
Есцхерицхиа цоли АТЦЦ 25922, Салмонелла ентеритидис АТЦЦ 13076, Салмонелла Типхи АТЦЦ 19430, Схигелла флекнери АТЦЦ 12022, Ентероцоццус фаецалис АТЦЦ 29212.
Очекује се да ће Есцхерицхиа цоли и Схигелла флекнери делимично инхибирати развијањем зелено-смеђе и смеђе колоније. Имајући у виду да обе салмонеле морају имати одличан развој са црним колонијама с металним сјајем, и коначно, Ентероцоццус фаецалис мора бити тотално инхибиран.
Референце
- Вилсон, В., и ЕМ МцВ. Блаир. Употреба жељезног медијума глукозе бизмут-сулфата за изолацију врсте Б. типхосус и Б. протеус. Часопис за хигијену, 1927; 26 (4), 374-391. Преузето са .јстор.орг
- Д'аоуст ЈИ. Утицај услова складиштења перформанси бизмут сулфитног агара. Ј Цлин Мицробиол. 1977; 5 (2): 122–124. Доступно на: нцби.нлм.них.гов
- ИВД лабораторије. Висмут-сулфитни агар према ВИЛСОН-БЛАИР. 2009.Доступно на: БисмутхСулфитагар_спан_Јан_2009% 20 (2) .пдф
- Химедиа Лабораториес. Висмут Сулпхите Агар. 2017. Доступно на: химедиалабс.цом
- Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. (2009). Баилеи & Сцотт Микробиолошка дијагноза. 12 ед. Редакција Панамерицана СА Аргентина.
- Моралес Р, де ла Цруз Д, Леива Г и Ибарра М. Бактериолошки квалитет сировог козјег млека произведен у Мираваллесу, Пуебла. Рев Мек де Инг Куим 2012; 11 (1): 45-54