СВИЈЕТЛО ЗЕЛЕНИ АГАР: ОБРАЗЛОЖЕЊЕ, ПРИПРЕМА И УПОТРЕБА - БИОЛОГИЈА - 2025

Бриллиант греен агар је медијум чврста културу са високим степеном селективности. Користи се искључиво за изолацију сојева рода Салмонелла, али постоје и неки изузеци, попут тифуса и паратифија који не расту на овом медијуму.

Претрага рода Салмонелла честа је у узорцима столице, воде или хране. У том смислу, овај медиј може бити врло користан. Овај агар су створили 1925. Кристенсен, Лестер и Јургенс, а касније га је модификовао Кауффманн.

Светло зелени агар. Колоније ферментације и ферментације. Извор: Изложба МЈ Рицхардсон / Невидљиви светови - 2012геограпх.орг.ук/пхото/2815842 Лиценца Цреативе Цоммонс.

Састоји се од плурипептона из пептичке пробаве животињског ткива и пробавног процеса панкреаса казеина, садржи и екстракт квасца, натријум хлорид, лактозу, сахарозу, фенол црвену, јарко зелену боју и агар-агар.

Карактеризира га прилично нестољубиво окружење за већину бактерија, које фаворизира раст салмонеле, али неки су колиформи способни да у њему опстану, развијајући се слабо.

Важно је напоменути да род Схигелла не расте на овом медијуму, нити Салмонелла типхимуриум или Салмонелла паратипхи. Стога, ако желите да изолујете ове микроорганизме, требало би користити и друге медије, на пример КСЛД агар.

Основе

Светло зелени агар

Свака од компоненти које чине медијум испуњава одређену функцију која одређује карактеристике и својства агара.

Плурипептони и екстракт квасца су извор хранљивих састојака из којих микроорганизми узимају азот и минерале потребне за њихов развој. Лактоза и сахароза су извор енергије за микроорганизме који их могу ферментирати.

Светло зелена је инхибиторна супстанца која спречава раст грам-позитивних бактерија и великог броја грам негативних микроорганизама.

Натријум-хлорид пружа осмотску стабилност медијуму. Док је фенол црвени индикатор пХ, он постаје обојен када открива производњу киселине из ферментације угљених хидрата.

Колоне колоније лактозе и сахарозе које не ферментирају расту на овом медију у ружичастој или провидној белој боји, на црвеној позадини. На пример, бактерије рода Салмонелла.

Док бактерије које ферментирају лактозу или сахарозу способне да расту на овом медијуму развијају се жуто-зелене или жуто-зелене колоније на зеленкасто-жутој позадини. На пример, Есцхерицхиа цоли и Клебсиелла пнеумониае.

Варијанте јарко зеленог агарја (БГА)

Постоје и друге варијанте јарко зеленог агара; Новобиоцин бриљантна зелена глукоза (НБГ) Агар и Новобиоцин Бриљантна зелена глицерол лактоза (НБГЛ) Агар.

Новобиоцин светло зелени глукозни агар

Садржи сој агар, триптиказу, феритни амонијум-цитрат, натријум-тиосулфат пентахидрат, фенол црвену, глукозу, светло зелену, новобиоцин и дестилирану воду.

Користи се за изолацију колонија салмонеле из узорака столице.

У овом случају, светло зелена и новобиоцин су инхибиторне супстанце које спречавају раст Грам позитивних бактерија и неких грам негативних микроорганизама.

Натријум-тиосулфат је извор сулфида, а феритни цитрат је извор гвожђа, оба неопходна за откривање производње водоник-сулфида кроз формирање талога црног жељезног сулфида.

Глукоза је ферментабилни угљени хидрат, а фенол црвени је индикатор пХ.

На овом медијуму колоније салмонеле развијају се велике с црним средиштем окруженим црвенкастим ореолима и затим јасним видљивим подручјем. Неки сојеви Цитробацтер фреундии стварају колоније идентичне онима Салмонелла.

Новобиоцин бриљантни зелени глицерол лактоза Агар (НБГЛ)

Овај медијум садржи триптиказа сојин агар, феритни амонијум-цитрат, натријум-тиосулфат, лактозу, глицерол, јарко зелену, новобиоцин и дестиловану воду.

Разлика између овог медијума и претходног је у томе што је глукоза супституисана лактозом, а глицерол и не користи црвени фенол.

Медијум се такође користи за изоловање врста салмонеле, колоније се развијају црно, због производње водоник-сулфида.

Само колоније који не производе киселине из глицерола или лактоза постигне довољну Х ₂ С производњу , јер ниске пХ омета Х ₂ С формирања . Ова резултира безбојних колонијама за већину врста Протеус и Цитробацтер.

Припрема

-Тежи 58 грама комерцијално добијеног дехидрираног медијума. Додајте га у литар редестилиране воде. Мешајте, оставите да одстоји неколико минута и ставите смешу на извор топлоте док се потпуно не отопи.

-Аутоклавирајте на 121 ° Ц током 15 минута, не прекорачите време стерилизације.

-Оставите да се одмори и послужите док је вруће у стерилним Петријевим посудама. Коначни пХ треба да буде 6,9 ± 0,2.

-Оставите да се очврсне и чувајте у фрижидеру до употребе. Пре сетве плоче треба узети собну температуру.

- Средство праха је зелене боје, а припремљени поприма наранџасто-смеђу или црвенкасто-зелену боју, зависно од пХ и комерцијалне компаније. Врло смеђа боја указује да је агар био прегрејан.

-Када се агар учврстио, не препоручује се пречишћавање, јер се медиј погоршава.

Употребе / апликације

Овај медијум се користи за тражење сојева рода Салмонелла из узорака столице и млечне хране, између осталог.

Пошто је то прилично неугодно окружење, препоручљиво је посејати обилну цепицу ако се користи директан узорак. У супротном, пре обогаћивања и обогаћивања узорака потребно је обавити пре сетве у овај медијум.

Како се неки сојеви салмонеле инхибирају или расту са потешкоћама, препоручљиво је да се овај медијум прати са другим селективним агарима за салмонелу.

Свака колонија са типичним карактеристикама салмонеле мора се подвргнути биохемијским тестовима ради њихове дефинитивне идентификације.

КА

За тестирање добрих перформанси јарко зеленог агарског медија, АТЦЦ сојеви се могу користити за посматрање њиховог развоја на њему.

Најчешћи сојеви који се користе за контролу квалитета су: Салмонелла ентеритидис АТЦЦ 13076, Салмонелла типхимуриум АТЦЦ 14028, Протеус мирабилис АТЦЦ 43071, Клебсиелла пнеумониае АТЦЦ 700603, Есцхерицхиа цоли АТЦЦ 25922, Схигелла флекнери АТЦЦ 12022, Стапхилоцоццус ауреус АТЦЦ 12022, Стапхилоцоццус ауреус АТЦЦ 12022.

Прве 3 треба да дају ружичасту или провидну белу колонију на црвеној позадини. Салмонела са добрим развојем и Протеус са малим или правилним растом.

За Клебсиелла и Есцхерицхиа очекује се жуто-зелене колоније са жутом позадином, а у случају Схигелла и Стапхилоцоццус-а треба их инхибирати.

Дехидрирани медијум се мора чувати на собној температури, на сувом месту, јер је медијум веома хигроскопан.

Референце

1. Лабораторио Дифцо Францисцо Сориа Мелгуизо СА Бриљантни зелени агар. 2009
2. Британниа Лаборатори. Светло зелени агар. 2015.
3. БД Лабораторија. БД Бриљантни зелени агар. 2013.
4. Конеман Е, Аллен С, Јанда В, Сцхрецкенбергер П, Винн В. (2004). Микробиолошка дијагноза. (5. изд.). Аргентина, уредништво Панамерицана СА
5. Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. 2009. Микробиолошка дијагностика Баилеи & Сцотт. 12 ед. Аргентина. Редакција Панамерицана СА