КСЛД АГАР: ОБРАЗЛОЖЕЊЕ, ПРИПРЕМА И УПОТРЕБА - БИОЛОГИЈА - 2025

КСЛД агар или ксилит Лизин десокицхолате агар медијума селективан и диференцијални чврста култура за изолацију ентеропатхогенс. Таилор је дизајнирала КСЛ агар (Ксилосе, Лисине) формулу како би побољшала изолацију рода Схигелла.

Приметио је да је овај род инхибиран у већини медија намењених изолацији ентеропатогена. Потом су додани натријум деоксихолат, натријум тиосулфат и жељезни амонијум цитрат да би повећали његову селективност. Ова формула се показала корисном и за изолацију шигеле и салмонеле.

Разлике колонија Схигелла, Салмонелла и колиформи на КСЛД агару. А. Схигелла сп, Б. Салмонелла сп, Ц. Цолиформс. Извори: А. Написала: ЦДЦ / Аманда Мооре, МТ; Др Тодд Паркер; Аудра Марсх, Љубазност: Библиотека слика јавног здравља Б. хттпс://уплоад.викимедиа.орг/википедиа/цоммонс/1/1ф/Салмонелла_специес_гровинг_он_КСЛД_агар_-_Сховинг_Х2С_продуцтион_-_Детаил.јпг Ц. Написао: ЦДЦ / Др. ЈЈ фармер, Љубазност: Библиотека слика јавног здравља

КСЛД агар се састоји од екстракта квасца, натријум-деоксихолата, ксилозе, лизина, лактозе, сахарозе, натријум-тиосулфата, ферментационог амонијум-цитрата, натријум-хлорида, фенола црвеног и агара. У већини бактериолошких лабораторија користи се дуо КСЛД агар и СС агар за испитивање узорака фекалија на Схигелла и Салмонелла.

Остале лабораторије преферирају комбинацију ЦХРОМагар Салмонелла и КСЛД агара, између осталих доступних опција. Ови двојаци могу се припремити у двоструким Петријевим јелима. С једне стране се поставља КСЛД агар, а на супротној страни други изабрани медијум.

Основе

-Хранљива снага

КСЛД агар има екстракт квасца, који служи као извор хранљивих материја за микроорганизме који расту на овом агару. Уз то, присуство угљених хидрата (ксилоза, сахароза и лактоза) обезбеђује енергију бактеријама које их могу ферментирати.

-Селективност медија

Као супстанца која инхибира, представља натријум деоксихолат; Ово спречава раст Грам позитивних бактерија, дајући медијуму селективан карактер.

-Диференцијална снага

Типичне колоније Схигелла

Као што је већ поменуто, КСЛД агар садржи ксилозу; Овај угљени хидрат ферментира све бактерије које расту у овом медијуму, изузев рода Схигелла.

Ово је једна од карактеристика која јој даје свој различит карактер, јер се колоније Схигелла од осталих разликују развијањем црвених колонија, док остале бактерије стварају жуте колоније.

Типичне колоније салмонеле

Род Салмонелла такође ферментира ксилозу, у почетку стварајући жуте колоније. Међутим, након што исцрпи угљени хидрат ксилозу, напада лизин због свог ензима лизин декарбоксилаза. Декарбоксилација лизина ствара лужине које боју колоније и околног медијума претварају у изворно црвену.

Ово понашање спроводи само салмонела, јер колиформи који декарбоксилат лизин не могу да алкалишу медијум. То је зато што колиформи такође ферментирају присутну лактозу и сахарозу; према томе, производња киселина је врло велика, што оставља жута колонија у тим бактеријама.

Треба напоменути да род Салмонелла не ферментира сахарозу или лактозу.

Производња Х

КСЛД агар омогућава детекцију Х ₂ С- производи Салмонелла ; За то се ослања на извор сумпора који представља натријум-тиосулфат и развијач реакције, а то је амонијум-цитрат ферит-а.

Потоња реагује са Х ₂ С (безбојни гас) и образује видљиви нерастворљива црни талог гвожђа сулфата. У том смислу, карактеристике колоније салмонеле биће црвене са црним центром.

Треба напоменути да за Х ₂ С реакција изградње догодити , алкални пХ је потребно. Зато друга Ентеробацтериацеае тај облик Х ₂ С то не могу или уради то лоше у овом медијуму, пошто високе киселости произведен ферментацијом угљених хидрата присутни инхибира или омета реакције.

-Натријум-хлорид, агар и фенол црвени

Коначно, натријум-хлорид одржава осмотску равнотежу; агар је средство за учвршћивање и фенол црвено открива промене пХ, окрећући боју колонија и медијума.

Припрема

Извагати 55 г дехидрираног КСЛД медија и растворити у 1 литру воде. Загрејати и мешати док не достигне тачку кључања. Не прегревајте, јер топлота оштећује медијум и ствара талог који мења морфологију типичних колонија.

Овај медиј не сме бити аутоклављен. Када се раствара, мора се пренети у водену купељ на 50 ° Ц. Кад се хлади, треба га служити директно на стерилним Петријевим посудама. Могу се сипати у појединачне тањире или двоструке тањире. Остављени су да се стврдне и чувају се у фрижидеру до употребе.

Темпер пре употребе. Како се ради о нестерилном медијуму, препоручује се припремати га близу датума употребе.

Коначни пХ медијума треба да буде 7,4 ± 0,2. Боја припремљеног медијума је наранџасто-црвена, провидна, без талога.

Ако имате базни агар Ксилосе Лисине (КСЛ), можете додати натријум деоксихолат, натријум тиосулфат и гвожђени амонијум цитрат. На овај начин се добија КСЛД агар формула.

Апликације

КСЛД агар се користи за опоравак ентеропатогена, углавном рода Схигелла и секундарно из рода Салмонелла. Корисно је за процену узорака столице, воде и хране.

Врсте узорака

Измет

Узорци столице могу се сијати директно на КСЛД агар, чинећи добру расподелу материјала да се добију изоловане колоније.

Да би се побољшао опоравак од салмонеле, КСЛД агар се може очистити из медијума за обогаћивање салмонеле.

Храна

У случају хране могу се употребљавати јухе за обогаћивање салмонелом и шигелом. За салмонелу, између осталог, можете користити селенитни цистински бујон, јарко зелени тетратионати јуху.

У случају Схигелле, може се обогатити бугелом Схигелла са 0,5 у / мл новобиоцина, инкубирати 16-20 сати на 42 ° ± 1 ° Ц.

Вода

Између осталог, у анализи воде препоручује се техника филтрације мембране и употреба КСЛД-агара.

Услови за садњу и идентификацију

Засејани медијум се инкубира аеробно на 35 ° Ц током 24 до 48 сати.

Примећене су типичне колоније сваког рода, сумњиве колоније треба да буду подвргнуте биохемијским тестовима за њихову идентификацију.

КА

За процену контроле квалитета медијума могу се користити следећи бактеријски сојеви: Салмонелла типхимуриум АТЦЦ 14028, Салмонелла ентеритидис АТЦЦ 13076, Салмонелла ентеритидис АТЦЦ 13076, Салмонелла абони ДСМ 4224, Схигелла флекнери АТЦЦ 12022, Схигелла соннеи АТЦЦ 25931, Есцхерицхиа цоли АТЦЦ 25922, Протеус мирабилис 4 , Клебсиелла пнеумониае АТЦЦ 33495.

За род Салмонелла карактеристично је представљање црвених колонија са црним средиштем или потпуно црним колонијама на овом медијуму. Док у роду Схигелла колоније морају бити црвене, тј. Боје медијума.

У случају Есцхерицхиа цоли очекује се да је тотално или делимично инхибирана; ако расте, колоније су жуте. За Протеус мирабилис очекује се слаб раст са ружичастим колонијама са или без црног центра. На крају ће род Клебсиелла расти као жуте колоније.

Последње мисли

КСЛД агар се широко користи у бактериолошким лабораторијама због његове високе ефикасности за опоравак Схигелла и такође има добар опоравак рода Салмонелла.

Ралл ет ал. (2005) у свом раду под насловом „Процена три бобица за обогаћивање и пет чврстих медија за откривање салмонеле у живинама“ показали су да су тестирана 3 класична медија (јарко зелени агар, СС агар и КСЛД агар) , КСЛД агар је имао најбољу стопу опоравка.

Проценти опоравка су били следећи: 13,8% за јарко зелени агар, 27,6% за СС и 34,5% за КСЛД. Рамбацх агар са 48% опоравка и ЦХРОМагар са 79,3% су надмашени само хромогеним медијумом.

Референце

1. Болести која се преносе храном. Шигеллоза. Доступно на: анмат.гов.ар
2. "КСЛД агар." Википедија, Слободна енциклопедија. 9 фебруар 2019, 11:46 УТЦ 10 април 2019, 19:25 википедиа.орг
3. ББЛ Лабораториес. ЦХРОМагар Салмонелла / БД КСЛД Агар (биплате). 2013 Доступно на: бд.цом
4. Лабораторија Неоген. КСЛД агар. Доступно на: фоодсафети.неоген
5. Францисцо Сориа Мелгуизо Лабораторија. КСЛД Агар. Доступно на: хттп://ф-сориа.ес/Информ
6. Ралл Л, Ралл Р, Арагон Ц, Силва М. Процена три подлоге за обогаћивање и пет подлога за детекцију салмонеле код живине. Браз. Ј. Мицробиол. 2005; 36 (2): 147-150. Доступно од: сциело.бр
7. Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. (2009). Баилеи & Сцотт Микробиолошка дијагноза. 12 ед. Редакција Панамерицана СА Аргентина.