- карактеристике
- Припрема
- Апликације
- Одређивање алкалне фосфатазе
- Одређивање антигена простате (ПСА)
- Одређивање активности ензима аргинин киназа или фосфокиназа
- Токсичност
- У људском
- Утицај на животну средину
- Референце
Тимолфталеин је индикатор пХ са тхе Сциентифиц Наме: 3,3-бис -изобензофуранон -1 (3Х) и његове хемијске формуле је Ц 28 Х 30 О 4 . Синтетише се из фталног анхидрида и тимола.
Овај пХ индикатор има веома осебујна својства, јер је при екстремно ниском пХ интензивно црвен (пХ <0). Касније постоји широк опсег пХ где је потпуно безбојан (пХ 1 - 9,2), са опсегом промене између 9,3 до 10,5, где се може променити у плаво, док је изнад 10,5 плаво интензивно.
Хемијска структура тимолфталеина при киселом пХ (безбојном) и при алкалном пХ (тамноплави). Извор: Даннибаланта /Пкхере.цом
Њена примена укључује давање индикатора базичне киселине у одређеним хемијским реакцијама. Такође се користи као хромоген у неким колориметријским реакцијама у којима се процењује ензимска активност. На пример, у одређивању алкалне фосфатазе.
Што се тиче токсичности, она је мање штетна од осталих пХ индикатора, а Национално удружење за заштиту од пожара (НФПА) класификује је као ниво 1 у односу на утицај на здравље; што значи да није канцерогена или мутагена.
Такође нема специфичну токсичност за било који циљни орган; то јест, представља мали ризик од агресије на здравље. Међутим, директан контакт са кожом и слузницом може проузроковати благу иритацију.
Са друге стране, у погледу запаљивости класификована је као 1, а по реактивности као нула.
карактеристике
ПХ индикатор тимолфталеин у чврстом облику је бели прах, у течном стању је интензивно црвен при пХ мањој од нуле, безбојан је при пХ 1-9,2 и плави је изнад 10,5. Моларна маса му је 430,54 г / мол, тачка топљења (258 ° Ц), док се тачка кључања креће између 248-252 ° Ц. Густина је 0,92 г / мЛ на 25 ° Ц
Нерастворљив је у хладној води и растворљив у етанолу. То није експлозивна материја.
Из предострожности, приликом транспорта, складиштења и руковања треба држати даље од јаких оксиданса.
Припрема
За волуметријске анализе се обично користи пХ индикатор, тимолфталеин у концентрацији од 0,1%. Да бисте то учинили, поступите на следећи начин:
- Измерити 100 мг тимолфталеина и растворити у 100 мл 95% етил-алкохола.
Такође се може припремити на следећи начин:
- Одмјерите 100 мг тимолфталеина и растворите у 60 мл апсолутног алкохола и додајте 40 мл дестиловане воде.
- Чувати на собној температури (15 - 25 ° Ц). Важно је да складиште буде хладно, прозрачено и без влаге.
Апликације
Одређивање алкалне фосфатазе
У одређивању овог теста постоји техника која се заснива на хидролизном деловању алкалне фосфатазе на тимолфталеин монофосфат. Ако је присутна алкална фосфатаза, она ће хидролизовати тимофталеин монофосфат, ослобађајући тимолталеин.
Ово ствара плаву нијансу на алкалном пХ. Ензимска активност алкалне фосфатазе директно је пропорционална интензитету формиране боје. Апсорбанција се очитава на 590 нм.
Одређивање антигена простате (ПСА)
У том смислу, Схао Ф и сарадници у 2018. години развили су колориметријску технику у којој користе мезопорозне наночестице силицијума који хватају молекуле тимолфталеина, а које су снажно везане присуством фенилтриметилоксисилана.
С друге стране, ове наночестице су обложене полиетиленимином (ПЕИ), погодујући везивању секундарног анти-ПСА антитела.
Са друге стране, узорак пацијента је имобилизован на тањиру; и када је ПСА присутан у контакту са наночестицама, он ће се везивати за антитела. Наночестице које се не вежу биће уклоњене.
Након тога, тимолфталеин ће се лако отпустити додавањем алкалног раствора, који ствара плаву нијансу. Степен боје је директно пропорционалан концентрацији ПСА.
Одређивање активности ензима аргинин киназа или фосфокиназа
Помоћу пХ индикатора тимолфталеин може се одредити ензимска активност аргинин киназе. Тест се заснива на следећем:
Ензим аргинин киназа је фосфотрансфераза која учествује у стварању фосфоаргинина, што је откривено у следећим хемијским реакцијама:
Извор: "Аргинин киназа." Википедија, Слободна енциклопедија. 10. јул 2018, 13:49 УТЦ 20 мај 2019, 03:58 википедиа.орг/
Ако се ова реакција изводи против пХ индикатора тимолфталеин, могуће је измерити активност ензима. То је могуће према следећем објашњењу: реакција се одвија код алкалног пХ, при чему ће тимолфталеин показати своју плаву боју.
Ензимска активност мери се изблиједјавањем боје која се огледа смањењем апсорпције на 575 нм, јер како ензим делује, ослобађају се протони (Х +), који закисељу медијум.
То узрокује да тимофталеин изгуби боју када се приближи зони окрета. Ако пХ падне испод 9,2, постаје потпуно безбојан.
Стога је интензитет плаве боје обрнуто пропорционалан активности ензима.
Токсичност
У људском
Ово једињење је мање токсично од већине пХ индикатора, јер му се до сада не приписују канцерогени или мутагени ефекти. Међутим, није потпуно безопасан: ако дође у контакт са кожом и слузницом, може поменути црвенило на поменутим подручјима.
Такође може произвести нежељене реакције ако се случајно прогута или удише.
У случају директног контакта са кожом и слузницом, захваћено подручје треба опрати пуно воде најмање 15 минута. А ако примете знаке иритације, требало би да пођу у најближи здравствени центар.
Зато се приликом руковања препоручује употреба сигурносних средстава попут хаљина, рукавица и сигурносних наочара.
Иако имате мали ризик од запаљивости, препоручује се да због опрезности држите подаље од упаљача.
Утицај на животну средину
Иако је мање токсичан за здравље људи, токсичан је у воденим срединама, па утиче на организме који се тамо налазе. Поред тога, има високу биоакумулациону моћ, а дугорочно је могуће да се формирају продукти разградње штетни за животну средину.
Због тога треба избегавати да овај производ доспе до површинских или подземних вода, јер би утицао на питку воду.
У том смислу, лабораторије које користе овај индикатор морају одлагати свој отпад у складу са прописима који су на снази у свакој земљи.
Референце
- Пиззани П, Годои С, Леон М, Руеда Е, Цастанеда М, Ариас А. Утицај повећања концентрације фитинског фосфора на активност ензима фитазе и алкалне фосфатазе у цревном епителу младих оваца. Влч. Циент (Марацаибо). 2008.18 (1): 59-64. Доступно на: сциело.орг.
- "Тимофталеин." Википедија, Слободна енциклопедија. 22 феб 2019, 04:40 УТЦ. 19. мај 2019, 22:20, ес.википедиа.орг.
- Схао Ф, Зханг Л, Јиао Л, Ванг Кс, Миао Л, Ли Х, Зхоу Ф. Анализу имуногорбенса без протеина специфичног антигена простате појачано ослобађањем молекула индикатора пХ заробљених у наночестицама Месопороус Силица. Анална хемија 2018; 17; 90 (14): 8673-8679.
- Иу З, Пан Ј, Зхоу ХМ. Директни континуирани пХ-спектрофотометријски тест за активност аргинин киназе. Протеин Пепт Летт. 2002; 9 (6): 545-52.
- Сцхарлау. Сигурносно-технички лист Тхимолпхтхалеин. 2013.Доступно на: јавериана.еду.цо
- Сигурносно-технички лист Тхимолпхтхалеин. МСДС. Национални универзитет Хередиа, Костарика. Доступно у: Тхимолпхтхалеин% 20 (3).
- "Аргинин киназа." Википедија, Слободна енциклопедија. 10. јул 2018, 13:49 УТЦ 20 мај 2019, 03:58 ен.википедиа.орг.