БХИ АГАР: ОСНОВА, ПРИПРЕМА И УПОТРЕБА - БИОЛОГИЈА - 2025

БХИ агар или Браин Хеарт Инфусион агар медијума је нутритивно чврста култура. На шпанском га називамо агаром за инфузију срца у мозгу. То је неселективни медијум за културу, што значи да се могу развити све врсте грам-позитивних и грам-негативних бактерија, као и неке квасне и нитасте гљивице.

Састоји се од инфузије мозга и срца телета, пептичног хидролизата из животињског ткива, хидролизата панкреаса казеина, натријум-хлорида, глукозе, динатријум-фосфата и агара.

БХИ плоче. Извор: Фотографију направио аутор МСц. Мариелса Гил.

Треба напоменути да је БХИ агар један од најчешће коришћених култура у лабораторијама бактериологије. Може се користити без суплемената као примарна култура, субкултура колонија добијених на другим селективним подлогама или за одржавање сојева у лабораторији.

С друге стране, идеалан је медијум који се користи као база у припреми обогаћеног медијума, као што су агар крви и чоколадни агар. Оба су идеална за изоловање захтевних микроорганизама са нутритивне тачке гледишта. Међутим, треба напоменути да пошто садржи глукозу није погодан за посматрање образаца хемолизе.

Исто тако, БХИ агар може се користити за припрему специјалних медија за изолацију тешко растућих патогених микроорганизама у уобичајеним медијима, међу којима су: Хаемопхилус сп, Франциселла туларенсис, Цоринебацтериум дипхтхериае и Хистопласма цапсулатум.

Са додатком антибиотика, БХИ агар постаје селективни медијум за изолацију гљивица.

Основе

Храњив је медијум за културу који изолује умерено захтевне микроорганизме, а његово обогаћивање може се повећати додатком крви и других додатака исхрани.

То је неселективни културни медиј, па омогућава раст већине грам-позитивних и грам-негативних бактерија, као и неких гљивица. Међутим, може се учинити селективним уз додавање антибиотика.

Медијум садржи инфузију мозга и срца телета, пептички хидролат животињског ткива и панкреасни хидролат казеина; Сва ова једињења делују као извори витамина, аминокиселина, азота и угљеника.

Глукоза је угљени хидрат који обезбеђује енергију микроорганизмима када је ферментирају. У међувремену, натријум-хлорид и динатријум-фосфат одржавају осмотску равнотежу и обезбеђују пХ близу неутралности. Коначно, агар даје средње чврсту конзистенцију.

Припрема

Измести се 52 грама дехидрираног медијума и раствара се у литри дестиловане воде. Доведите смешу до извора топлоте до кључања, често мешајући током процеса растварања.

Плоче или клинови БХИ агар могу се припремити без додатака.

Клинови

За израду клинова, служите препарат док се половина сваке епрувете не напуни, поклопите и стерилите у аутоклаву на 121 ° Ц 15 минута, а када напустите, положите на базу док се не стврдну. Касније чувајте у фрижидеру до употребе.

БХИ клинови за бактериотеку. Извор: Фотографију направио аутор МСц. Мариелса Гил.

Плоче

Растворена смеша се аутоклавира на 121 ° Ц током 15 минута, након чега се остави, остави се да се охлади на 50 ° Ц и 20 мл медијума се сервира у стерилним Петријевим посудама. Омогућено им је да се стврдне, преокрену и чувају у фрижидеру до употребе. Оставите плоче да дођу до собне температуре пре сетве.

ПХ медијума мора остати на 7,4 ± 0,2.

Сирови медијум је беж боје, а припремљени медијум је светло амберне боје.

Припрема агар крви

После стерилизације медијума, охладите на температуру од приближно 45 до 50 ° Ц, а затим додајте крв (50 мл), лагано измешајте да се хомогенизује и асептистички сервирајте 20 мл у свакој Петријевој посуди. Ако се на тањиру формирају мехурићи, лакши пламен треба брзо да прође преко мехурића да би се елиминисали.

Исто тако, посебни медијуми се могу припремити додавањем одговарајућих адитива када смеша достигне температуру од 45 до 50 ° Ц.

Средина остаје трешња црвена.

Апликације

Користите без додатака

БХИ агар без адитива користан је као примарна култура и за сјетву чистих сојева ниско или средње захтјевних микроорганизама за њихову накнадну идентификацију.

Како је медијум са светлом бојом, идеалан је за посматрање пигмената и пошто не садржи ометајуће супстанце, на њему се могу извршити неки биохемијски тестови, попут оксидазе и каталазе, или се из тих колонија могу поставити друга биохемијска испитивања. агар.

Исто тако, БХИ агар клинови се широко користе за одржавање сојева одређено вријеме у лабораторији (бактериотека).

Плоче или клинови засађени површински са бактеријским сојевима инкубирају се на 37 ° Ц током 24 до 48 сати. У међувремену, у гљивицама температура и време инкубације зависе од врсте гљиве која се тражи.

Као базни агар за припрему других медијума

Помоћу ове базе могу се припремити обогаћени и селективни медији.

Обогаћен

Његова главна функција је да служи као основа за припрему крвног агара за рутинску употребу у микробиолошким лабораторијама. Посебно, база БХИ погодује изолацији Стрептоцоццус сп. Међутим, недостатак је што није примерен за посматрање образаца хемолизе јер садржи глукозу.

Такође се користи у припреми зечјег или коњског агарског крви за изолацију бактерије Хаемопхилус сп. За најбоље резултате може се додати додатак за обогаћивање (ИсоВиталеКс).

Ако узорци долазе из респираторног тракта, у агар се може додати бакитрацин који инхибира пратећу флору и повећава вероватноћу опоравка Хаемопхилус сп.

Алтернативно, агар крви (јањетина или човек) са цистин телуритом може се припремити за изоловање Цоринебацтериум дипхтхериае. Исто тако, корисно је припремити агар са зечјом крвљу, са додатком цистина и глукозе за изолацију Франциселла туларенсис.

Засејавање плоча агарима у крви врши се исцрпљивањем и инкубирају се на 35-37 ° Ц током 24-48 сати у микроаерофилности (5-10% ЦО ₂ ).

Селективно

Овај медијум са додатком антибиотика може заменити агар Сабоурауд за изоловање гљивица.

Комбинација БХИ агара са хлорамфениколом - гентамицином или пеницилином -, стрептомицином и коњском крвљу је идеална за изолацију Хистопласма цапсулатум.

Зависно од микроорганизма који треба да буде изолован, препоручује се инкубација на 35-37 ° Ц или на собној температури у аеробиози. Понекад је инкубација потребна у оба температурна опсега, користећи две плоче за то.

Неке гљивице, попут Трицхопхитон ментагропхитес, морају се инкубирати на собној температури највише 7 дана.

КА

Из сваке припремљене шарже препоручује се 24 сата инкубирати 1 плочу или клин на 37 ° Ц и проверити да нема раста; Посебно је важан при припреми агар у крви, јер се лако загађује мед.

С друге стране, квалитет медијума се може проценити инокулацијом познатих или сертификованих стандардних сојева и посматрањем њиховог развоја.

У том смислу, за процену БХИ агара без адитива могу се користити сојеви Есцхерицхиа цоли АТЦЦ 25922, Стапхилоцоццус ауреус АТЦЦ 25923 или Цандида албицанс АТЦЦ 10231, који се инкубирају на 37 ° Ц у аеробиози током 24 до 48 сати. У свим случајевима се очекује задовољавајући раст.

Сојеви Стрептоцоццус пиогенес АТЦЦ 19615, Стрептоцоццус пнеумониае АТЦЦ 6305 или Трицхопхитон ментагропхитес АТЦЦ 9533 могу се посејати за процену плоча са агарима у крви.

Бактеријски сојеви се инкубирају на 37 ° Ц у микроаерофилности током 24 сата, док се гљивица инкубира на собној температури у влажној комори до 7 дана. У свим случајевима се очекује задовољавајући раст.

Референце

1. Британниа Лабораториес. Инфузија мозга срца Агар. 2015. Доступно на: британиалаб.цом.
2. БД Лабораториес. Инфузија мозга срца (БХИ) Агар. 2013. Доступно на: бд.цом.
3. Лабораториос Дифцо Францисцо Сориа Мелгуизо, СА Инфузија мозга срца Агар. 2009.
4. Неоген Лаборатори. Инфузија мозга срца Агар. Доступно на: фоодсафети.неоген.цом
5. Гил М. Крвни агар: основа, употреба и припрема. 2018. Доступно на: лифедер.цом.
6. Сарадници Википедије Инфузија мозга срца. Википедија, Слободна енциклопедија. 19. септембар 2018, 03:58 УТЦ. Доступно на: википедиа.орг. Приступљено 2. марта 2019.
7. Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. (2009). Баилеи & Сцотт Микробиолошка дијагноза. 12 ед. Редакција Панамерицана СА Аргентина.