Агар БИГГИ је чврста средње селективног и диференцијал културе. Дизајниран је тако да изолује и помогне у идентификацији главних врста Цандида. Име БИГГИ долази од акронимом на енглеском Бисмутх Глуцосе Глицине Квасац.
Оригиналну формулу је креирао Ницкерсон, због чега је овај медијум такође познат и као Ницкерсон агар. Тренутно се састоји од екстракта квасца, глицина, декстрозе, амонијум-цитрата, бизмут-цитрата, натријум-сулфита и агара.
Графички приказ БИГГИ агара. Извор: Флицкр.цом
ВЕЛИКИ агар је формулисан за разликовање врста Цомплек Ц. албицанс, Ц. тропицалис, Ц. крусеи и Ц. кефир, али расту и друге врсте, као што су Цандида глабрата, Ц. парапсилосис, Ц. гуиллиермондии, Трицхоспорун сп, Геотрицхум цандидум и Саццхаромицес церевисиае.
Има добру осетљивост и специфичност, међутим, у поређењу са другим медијима са сличном функцијом, на другом је месту, када га је надмашио ЦХРОМагар. Из тог разлога, многе лабораторије више воле ову последњу, мада је много скупља.
Треба бити јасно да употреба БИГГИ агара, као и других сличних средстава, помаже у брзој претпоставци, али никада потврдној. Због тога морају бити доступне додатне методе идентификације; на пример, систем идентификације Витек 32 и АПИ 20.
Основе
БиГГИ агар се сматра делимично селективним медијумом за изолацију квасца, посебно рода Цандида, иако могу да расту и други родови.
Такође је различита подлога, јер ће се у зависности од врсте уочавати различите карактеристике у погледу изгледа, боје, облика и величине. Сматра се хромогеним медијумом, због развоја различитих боја у колонијама.
Боја колонија квасца настаје због присуства бизмут сулфита у агару. Ницкерсон је схватио да квасци рода Цандида изводе ванћелијску редукцију бизмут сулфита, претварајући га у бизмут сулфид (нерастворљива црна супстанца). То доводи до светло смеђе до црне колоније.
Овај агар садржи екстракт квасца и декстрозу, који обезбеђује извор основних хранљивих материја и енергије за развој квасца. Глицин је стимуланс раста квасца, док инхибира раст одређених бактерија.
У том истом смислу, амонијум и бизмут цитрат, као и натријум сулфит делују као инхибитори раста бактерија. Агар је средство које даје средње чврсту конзистенцију.
Припрема
Одважите 45 г дехидрираног медијума за раствор и растворите у литру дестиловане воде. Протресите и загрејте смешу, кључајући 1 минут, до потпуног растварања. Овај медијум за културу није аутокласиван.
Након хлађења на око 45 ° Ц у воденој купељи, сипати 20 мл у стерилну Петријеву посуду.
Боја дехидрираног медијума је жућкасто сива, а припремљен је жућкасто-бели гел у коме се може приметити благи флокулирајући талог.
ПХ треба да буде 6,8 ± 0,2.
Припремљени медијум треба чувати у фрижидеру (4 ° Ц) и заштитити од светлости. Како се ради о медијуму који се не може аутоклавирати, требало би га користити што је пре могуће. Његова употреба се препоручује пре 3 дана након припреме.
Употреба
Плоче се инкубирају на собној температури (25 ° Ц) током 24, 48 и 72 сата, а време инкубације може се продужити до 5 дана.
Свака врста Цандида развија одређене карактеристике због којих се разликују једна од друге. Произвођачи медијума описују следеће карактеристике за сваку врсту:
-Цандида албицанс комплекс: развија се на овом агару као глатке, округле, смеђе или црне колоније, са благом мицелијом. С изузетком што тамна боја не дифундира до средине.
-Цандида тропицалис: свијетле, мале, тамно смеђе колоније са црним средиштем и благом мицелијом. Тамна боја се шири према средини, што је типично за ову врсту, након што је инкубирана 72 сата.
-Цандида крусеи развија велике, равне, грубе колоније са смеђом до црнкастом обрубом.
-Цандида паракрусеи: колоније средње величине, већином храпаве, равне. Боја може варирати од ведре тамно црвенкастосмеђе до светло црвенкастосмеђе. Граница колонија има опсежан, жућкасти мицелијум.
-Цандида стеллатоидеа: развија средње, равне колоније, тамно смеђе, готово црне. Развој мицелија је врло мали.
Студија коју су спровели Иуцесои и Марол 2003. године, показала је да медијум ЦХРОМагар има бољу осетљивост и специфичност за диференцијацију и идентификацију различитих врста Цандида у односу на БИГГИ агар.
КА
За контролу стерилности, неинокулиране плоче се инкубирају на 25 ° Ц, у мраку током 24 до 48 сати, очекује се да нема никаквог раста или промене боје.
АТЦЦ сојеви препоручени за контролу квалитета медијума су:
Цандида албицанс АТЦЦ 60193 комплекс, Цандида глабрата АТЦЦ 2001, Цандида крусеи АТЦЦ 34135. У свима њима се очекује раст као што је горе описано.
Такође се могу користити следећи сојеви:
Есцхерицхиа цоли АТЦЦ 25922, Псеудомонас аеругиноса АТЦЦ 27853 и Стапхилоцоццус епидермидис АТЦЦ 12228. У прва два се очекује потпуна инхибиција, али у случају делимичног раста колоније ће бити крем боје.
У случају С. ауреус, очекује се да га тотално инхибирају, али ако делимично расте, његове колоније су беле.
Ограничења
Неке бактерије су способне да расту у овом медијуму и могу чак и да постану тамне боје, симулирајући колонију Цандида, али када се коло размаже и посматра под микроскопом, лако се одбацује.
Табела: Карактеристике колонија неких квасца на БИГГИ агару према раду Иуцесои М и Марол С.
Извор: Иуцесои М, Марол С. Перформансе ЦХРОМАГАР цандида и БИГГИ агара за идентификацију врста квасца. Анн Цлин Мицробиол Антимикроб. 2003; 2 (8): 1-7
Референце
- Иуцесои М, Марол С. Перформансе ЦХРОМАГАР цандида и БИГГИ агара за идентификацију врста квасца. Анн Цлин Мицробиол Антимикроб. 2003; 2 (8): 1-7.
- МЦД ЛАБ. Технички лист БИГГИ Агар. Доступно на: мцдлаб.нет/
- Лаб Неоген. БИГГИ Агар. Доступно на: фоодсафети.неоген.цом
- Цонда Пронадиса Лабораториес. БИГГИ агар. Доступно на: цондалаб.цом
- БД Лабораториес. БД БиГГИ Агар (Бизмут Глукоза Глицин, квасац Агар). 2011. Доступно на: бд.цом