ПРЕХРАМБЕНИ АГАР: РАЦИОНАЛНОСТ, ПРИПРЕМА И УПОТРЕБА - БИОЛОГИЈА - 2025

Нутријената агар неселективни медијум и не диференцијал чврста културе. У овом медију расту све врсте бактерија које нису нутритивно важне.

То је једноставан медијум и, упркос називу, садржи нижу храњиву вредност у поређењу с другим сличним медијумима, као што су Браин Хеарт Инфусион Агар или Триптицасе Сои Агар.

Колонија рачуна на хранљиви агар

Његова корисност у лабораторији је веома разнолика. Користи се углавном за субкултивацију врста, одржавање сојева, бројање колонија, као основа за припрему крвног агара, између осталог.

Исто тако, захваљујући својој свијетло беж боји, производња пигмената генерисаних неким бактеријским сојевима може се изузетно разликовати, као што је зеленкасти пигмент Псеудомонас аеругиноса, циглено црвени пигмент који производи Серратиа марцесценс на собној температури, златно жути пигмент стафилокока ауреус, између осталих.

Поред тога, један је од најјефтинијих медија у порасту који се налазе на тржишту.

Основе

Као што је већ поменуто, то је веома једноставан медијум који се ослања на обезбеђивање хранљивих материја за раст бактерија без ограничења и без сложених реакција за интерпретацију.

Како је медијум прозиран, идеалан је за бројање колонија методом дубинске сетве.

Састав

Састоји се углавном од екстракта меса или екстракта квасца, пептона или желатинозног панкреасног варења, агар-агар-а, натријум-хлорида и дестиловане воде.

Месни или квасни екстракт и пептони представљају есенцијалне изворе угљеника и минерала (азот, фосфор и сумпор) који ће бактерије користити као извор енергије и фактора раста.

Слично томе, агар-агар је база свих чврстих култура, који је заменио желатину, што је прво базно једињење које је Роберт Коцх користио да би својој медију дао чврсту конзистенцију.

Агар је полисахарид састављен од галактозе, галактоманнана, агарозе и агаропектина. Поставља се на 40 ° Ц, а топи се близу 100 ° Ц.

Натријум-хлорид пружа средству осмоларност потребну за развој бактерија.

Најзад, вода служи за хидратацију и растварање лиофилизованих једињења. Треба користити дестилирану воду прилагођену неутралном пХ. Вода из славине не треба користити јер садржи калцијум и магнезијум који могу реаговати са фосфатима у медијуму и формирати нерастворљиве соли.

Припрема

За један литар хранљивог агара треба извагати 31 г дехидрираног медијума. Ставите у тиквицу и растворите у литру дестиловане воде. После 5 минута стајања, загревајте изнад извора топлоте и непрестано мешајте док не кључају 1 или 2 минута.

Припрема медијума за културу

Тиквица се затим стави у аутоклав и стерилисе на 121 ° Ц током 20 минута.

Стерилизација у аутоклаву

На крају се уклања из аутоклава и сервира у стерилним Петријевим посудама, користећи поклопац с ламинарним протоком или Бунсенов пламеник.

Ако су Петријеве посуде за једнократну употребу (пластичне), медијум треба дистрибуирати када температура агарја има приближно 50 ° Ц да се спречи да се деформишу од прекомерне топлоте.

Оставити да се очврсне и чувати на преокреном држачу за плоче и хладити на 2-8 ° Ц до употребе.

Плоче се морају темперирати прије садње. Плоче са храњивим агарима се не смеју користити ако су онечишћене или дехидриране.

ПХ припремљеног медијума мора да се подеси на 7,3 ± 0,2.

Апликације

То је најједноставнији медијум за културу који се користи у микробиолошкој лабораторији. Његова формулација је одлична за раст незахтевних бактерија.

Његове главне употребе су објашњене у даљем тексту:

Као основа за припрему крвног агара

Овај медијум се понекад користи као база за припремање крвног агара, али то није база која се најчешће користи.

Стимулирајте спорулацију бактерија које стварају споре

Овај медијум за културу је посебно користан за подстицање споралације бактерија које формирају споре, као што је Бациллус сп.

За то се сој рода Бациллус посеје и инкубира током 24 сата на 37 ° Ц у аеробиози. Једном када колоније нарасту, плоча се подвргава температурном стресу, односно температура пећнице се повећава на 44 ° Ц и оставља 24 сата или се ставља у фрижидер на 24 сата.

На крају времена, на култури се наносе мрље од грама или мрље од споре Схаеффер-Фултон. У њима ће се уочити бацили са ендоспорама (споре унутар бацила) и егзоспоре (споре изван бацила).

Одржавање напрезања

Неке истраживачке или универзитетске лабораторије за подршку захтевају одржавање одрживих бактерија клиничког значаја што је дуже могуће како би се банка бактерија (бактериотека) користила за истраживачки рад или за припрему наставних пракси, где су Студенти ће научити да манипулишу и идентификују ове микроорганизме.

У ове сврхе може се користити храњиви агар, као и агар за инфузију мозга. Агар се припрема, сипа у цеви са бакелитним поклопцем и нагиње на базу на такав начин да се агар очврсне формирајући блок на дну и конус на површини (кљун флауте).

Свака епрувета је означена именом бактерија које ће сејати и датумом. Свака од бактерија ће сејати на зрну и инкубирати се током 24 сата. Када колоније нарасту, епрувете се чувају на собној температури.

Бактериотека се мора обнављати од 1 до 3 месеца, како би се избегла контаминација и дехидрација медијума, као и смрт бактерија.

Само се не избирљиве бактерије могу одржавати на овај начин.

Број колонија

Иако постоје специјализована средства за бројање колонија, као што је стандардни бројач агар, храњиви агар може се користити у ту сврху, било површинским сејањем дригалским лопатицом или дубином. Из тог разлога је веома корисна у микробиолошкој анализи хране и воде.

Покретање дијагностичких тестова

Како се ради о медијуму који не садржи крв или било које друге адитиве, идеално је за узимање колонија узгајаних на овом медијуму да се изврши тест каталазе.

Исто тако, због његове светлосне боје, индиковано је да ће извршити тестове оксидазе директно на површини засијаног агара, без сметњи.

Опоравак мезофилних аероба из рекреативних сланих вода (Плаже)

Храњиви агар припремљен са 10% морске воде је користан за процену мезофилних аероба у плажним водама.

На тај се начин може схватити стварни ниво контаминације који воде овим микроорганизмима имају у виду, јер се у овој врсти узорака резултати преклапају када се користе медијуми који се припремају на конвенционалан начин.

То су показали Цортез и др. 2013. године у истраживачком раду.

То се може објаснити наглом променом коју бактерије пролазе прелазећи из хиперсолираног окружења у окружење са мало соли, због чега микроорганизми улазе у стање летаргије у којој су одрживи, али се не могу култивисати.

Референце

1. "Храњиви агар." Википедија, Слободна енциклопедија. 13 сеп 2016, 20:33 УТЦ 29 дек 2018, 21:04 ен.википедиа.орг
2. Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. (2009). Баилеи & Сцотт Микробиолошка дијагноза. 12 ед. Аргентина. Редакција Панамерицана СА
3. Конеман Е, Аллен С, Јанда В, Сцхрецкенбергер П, Винн В. (2004). Микробиолошка дијагноза. (5. изд.). Аргентина, уредништво Панамерицана СА
4. Цортез Ј, Руиз И, Медина Л, Валбуена О. Утицај медијских култура припремљених уз морску воду на здравствене показатеље у морским водама бања у Цхицхиривицхе, држава Фалцон, Венезуела. Рев Соц Вен Мицробиол 2013; 33: 122-128
5. Паредес В, Диас В, Силва де Алмеида М и Цардосо М. Микробиолошки квалитет воде за осемењавање доза за свиње. Циент.Агро.Амаз. 2013; 1 (2): 42-49.
6. Гарциа П, Паредес Ф, Фернандез дел Баррио М. (1994). Практична клиничка микробиологија. Универзитет у Кадизу, друго издање. УЦА Публицатион Сервице.