Агар Салмонелла Схигелла такође познат као СС агар је селективан и диференцијални средња умерено, специјално дизајнирана за изолацију ентеропатхогениц бактерија из родова Салмонелла и Схигелла, оба узорка еколошке као клинички.
СС агар има сложен састав; Састоји се од екстракта меса, пептона, лактозе, жучних соли, натријум-цитрата, натријум-тиосулфата, ферит-цитрата, агарја, неутралне црвене, јаркозелене и дестиловане воде. С обзиром на велику селективност, могу се посејати узорци са обилном мешовитом флором.
СС агар са колонијама Салмонелла сп. Извор: Манурк27, из Викимедиа Цоммонс
У микробиолошким лабораторијама мед Салмонелла-Схигелла се широко користи за испитивање присутности Салмонелла и Схигелла у узорцима столице против дијареје, канализације, питке воде и хране.
Понекад је потребно користити пре-обогаћујуће бродове (лактозни јух) и прелив за обогаћивање (селенитни цистински брод) за опоравак сојева салмонеле.
Ови кораци су потребни када се сумња на постојање салмонеле у веома малој количини или када се сој може злоупотребити процесима типичним за индустријску производњу, углавном прерађену храну. Такође је препоручљиво обогатити узорке столице од пацијената који су лечени антибиотицима.
Након тога, обогаћени јух може бити засијан на агару Салмонелла-Схигелла и другим сличним подлогама, попут ксилозног агара, лизиног деоксихолата (КСЛД) и ентеричког Хектоен агарја (ХЕ).
Основе
Свака компонента медија за културу салмонеле и шигеле има специфичну функцију, а смеша у целини даје јој својства која га карактеришу.
Храњива моћ
Екстракти меса и пептон (дигестирани из казеина и животињског ткива) обезбеђују потребне храњиве састојке (нитрогене, угљеник и витамине) за развој микроорганизама који могу да толеришу остале компоненте.
Доследност
Агар-агар је одговоран за обезбеђивање чврсте конзистенције медијуму.
Селективно
Овај медијум је веома селективан јер садржи жучне соли, натријум цитрат и јарко зелену боју. Због тога инхибира раст свих грам-позитивних бактерија и већине грам-негативних бацила, укључујући неке колиформне облике.
Док бактерије рода Салмонелла и неки врста Схигелла подржавају ова једињења.
Углавном, род салмонеле је врло отпоран на жучне соли, толико да су у стању да живе у жучној кесици неких пацијената са носачима који стално проливају бактерије у своје столице.
Диференцијално
Лактоза је ферментабилни угљени хидрат који помаже у разликовању сојева који ферментирају лактозу и оних који не ферментирају. Ово својство је доказано присуством пХ индикатора, који је у овом медијуму фенол црвен.
Сојеви ферментације лактозе дају црвене колоније, док су сокови који не ферментирају безбојни. Ова карактеристика је важна, јер Салмонела и Схигелла не ферментирају лактозу.
С друге стране, овај медијум садржи натријум тиосулфат као извор сулфида, а феритни цитрат као извор гвожђа. Оба једињења су у стању да разликују бактерије које су способне да производе водоник сулфид. Оне реагују тако да формирају видљиви, нерастворљиви талог црног феро сулфида.
Ово својство је пронађено у неким сојевима рода Салмонелла. Њихове колоније су обично безбојне, са црном тачком у средини. Остатак салмонелама не производе Х 2 С и развија у виду безбојних колоније.
С друге стране, колоније рода Схигелла су равне безбојне боје без црнила.
Припрема
Овај медијум је врло једноставан за припрему.
Извагати 63 г дехидрираног комерцијалног медијума и растворити у литру дестиловане воде. Загрејати раствор и мешати. Смеша може да кључа и до неколико минута.
Овај медиј не сме бити аутоклављен. Након растварања сервира се директно на једноструким или двоструким стерилним тањирима.
Кад се стврдну, они се поредају на обрнути начин на тромбоцитима и чувају у фрижидеру (2-8 ° Ц) до употребе.
Средство после припреме треба да остане на пХ 7,2 ± 0,2 и наранџасто-црвене боје.
Важно је да се плоче загреју пре сетве узорака. Оригинални узорак може се сијати директно, испуштајући материјал на део агара и потом стријати одатле.
У случају употребе обогаћених бујона, додајте део селенитног бујона и посејте дригалски лопатицом.
Инкубирајте 24 сата на 37 ° Ц у аеробиози.
Имајте на уму да број грама који ће се извагати и крајњи пХ медијума може варирати од једне комерцијалне куће до друге. Средња база увек доноси индикације за његову припрему.
Употреба
Често се користи у анализи културе столице и у микробиолошком истраживању узорака отпадних вода, воде за пиће и хране.
Често се припремају двоструке плоче, на једној страни се поставља агар салмонела-шигелла, а на другој КСЛД агар.
Ограничења
-Неки сојеви Схигелла не расту у овом медијуму. Због тога се не препоручује за примарну изолацију овог рода.
-Није свака прозирна колонија са црним центром указује на салмонелу; Морају се извршити биохемијска испитивања да би се тачно идентификовала, будући да су колоније неких протеових сојева нераздвојне од бактерија салмонеле.
- Дехидрирани медијум мора водити рачуна о излагању околини, пошто је веома хигроскопан. Због тога се мора чувати у сувом и добро затвореном окружењу. Отворено за врло кратке периоде.
-Све време, жучне соли у медијуму се могу исталожити, формирајући слику сличну простирки у агару, али то не утиче на резултате.
-Неки сојеви Схигелле могу споро ферментирати лактозу.
КА
Да би се доказало да медијум исправно делује, пожељно је да се поседују познати или сертификовани контролни сојеви и проматра се да ли раст задовољава очекиване карактеристике.
За то се могу користити сојеви Е. цоли, Ентеробацтер сп, Клебсиелла пнеумониае, Схигелла флекнери, Салмонелла типхимуриум или Ентероцоццус фаецалис.
Очекивани резултати су:
Ентеробацтер и Клебсиелла ------ велике колоније и црвени или ружичасти мукоиди.
Схигелла флекнери ---------- прозирне или безбојне равне колоније.
Салмонелла типхимуриум ------ безбојне колоније са црним центрима.
Ентероцоццус фаецалис -------- тотална инхибиција.
Референце
- Дифцо Францисцо Сориа Мелгуизо Лабораториес. Агар салмонеле-шигеле. 2009. Доступно на: ф-сориа.ес
- БД Лабораторија. БД Салмонелла-Схигелла Агар. 2013. Доступно на: бд.цом
- Британниа Лабораториес. Салмонела-Шигелла Агар. 2015. Доступно на: британиалаб.цом
- Валтек дијагностика. Салмонелла-Схигелла Агар (СС Агар). 2010. Доступно на: андинамедица.цом
- Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. (2009). Баилеи & Сцотт Микробиолошка дијагноза. 12 ед. Редакција Панамерицана СА Аргентина.
- Конеман Е, Аллен С, Јанда В, Сцхрецкенбергер П, Винн В. (2004). Микробиолошка дијагноза. 5. изд. Редакција Панамерицана СА Аргентина.