ТРИПТИЦАСЕИН СОЈ АГАР: ОБРАЗЛОЖЕЊЕ, ПРИПРЕМА И УПОТРЕБА - БИОЛОГИЈА - 2025

Сои агар триптона или Триптицасе соја агар је средње чврста култури и нутритивна неселективни. Означен је словима ТСА због акронима на енглеском Триптицасе Сои Агар. Састоји се од триптеина, сојиног пептона, натријум-хлорида и агар-агара.

Због велике храњиве моћи, идеалан је за узгој умерено захтевних и незахтевних микроорганизама. Средство без додатних додатака не препоручује се за примарне културе, али је веома корисно за субкултурање чистих сојева и одржавање њихове одрживости, између осталог.

Клинчићи трипицасеин соја агар у епруветама са капима од бакелитита. Извор: Фотографија коју је снимио аутор МСц. Мариелса Гил.

Такође, овај агар служи као основа за припрему обогаћеног медијума, попут крвног агара, посебно када је потребно посматрати узорке хемолизе и монтирати такто оптокуине и бацитрацин, неопходне у дијагнози Стрептоцоццус пнеумониае и Стрептоцоццус пиогенес.

С друге стране, у комбинацији са антибиотицима корисно је изоловати клинички важне факултативне и строге анаеробне микроорганизме из узорака са мешовитом флором.

Коначно, састав трипицасеин соје агар и његово деловање испуњавају захтеве утврђене у различитим фармакопејама (европским, јапанским и северноамеричким).

Основе

За правилан развој бактерија потребно је присуство енергетских залиха, попут аминокиселина, витамина, пурских и пиримидних база.

У том смислу, триптеин и сојин пептон пружају ове храњиве састојке микроорганизмима и на тај начин омогућавају њихов пуни развој. Међутим, за брзе бактерије потребно је надопунити овај агар са дефибринираном или загрејаном крвљу како би се повећало његово обогаћивање.

С друге стране, ако се антибиотику додају у медијум, он постаје селективни медијум. 0,6% екстракта квасца такође се може додати да фаворизује изолацију врста рода Листериа, док је додатак цистин телурита и јагњеће крви идеалан за Цоринебацтериум дипхтериае.

Коначно, натријум-хлорид пружа осмотску равнотежу медијуму, а агар даје чврсту конзистенцију.

Припрема

Плоче са соптом Агар Триптицасеин

Да бисте припремили триптикасеин сојин агар, на дигиталној скали треба извагати 40 г дехидрираног комерцијалног медијума. Раствара се у литру дестиловане воде која се налази у тиквици.

Смеша се остави да почива 5 минута, а затим се однесе у извор топлоте да се раствара медијум. Треба га често мешати и кувати 1 до 2 минута. Након тога, медијум се стерилизира у аутоклаву на 121 ° Ц током 15 минута.

Оставите да се охлади на 50 ° Ц и распоредите у стерилне Петријеве посуде. Оставите да се стврдне, преокрените, наручите у плоче и чувајте у фрижидеру.

Коначни пХ медијума би требао бити 7,3 ± 0,2.

Треба напоменути да је боја дехидрираног медија за културу светло беж боје и треба је чувати на температури од 10 до 35 ° Ц, на сувом месту.

Са своје стране, припремљени агар је светлосмеђе боје. Припремљене плоче чувајте у фрижидеру (2-8 ° Ц) до употребе.

Плоче морају да достигну собну температуру пре употребе.

Плоче триптацеина соја агар допуњене крвљу

Крвни агар се припрема додавањем 5% дефибриниране крви у време хлађења трипсина сојиног агара на 50 ° Ц. Смеша се хомогенизује ротирањем лаганим покретима.

Сервирајте у стерилним Петријевим посудама. Средња боја би требала бити трешња-црвена.

Плоче трипицасеин соја агар допуњене загрејаном крвљу

Да бисте припремили агар крви на бази ТСА, поступите на исти начин као што је већ описано, али када напустите аутоклав, оставите да се одмара док температура медијума не буде приближно 56 до 70 ° Ц. У то време се ставља крв и меша све док се медијум не постане браон.

Сервирајте у стерилним Петријевим посудама. Боја медијума је чоколадно браон.

Триптицасеин клинови од сојиног агара

Поступак припреме агарја је исти као онај који је описан за тањире, с разликом што се уместо послуживања медијума у ​​Петријевим посудама, пре стерилизације, дистрибуира између 10 до 12 мл у епруветама са Бакелит поклопцем.

Након тога епрувете се аутоклавирају на 121 ° Ц током 15 минута. Када одлазе, нагињу се уз помоћ ослонца и пуштају се да се учврсте.

Припремљени клинови посеју се по површини и служе одржавању одређених незахтевних микроорганизама одрживим током одређеног времена.

Апликације

Триптицасеин сојин агар се користи у следећим случајевима:

-Као основа за припрему класичног агерица у крви који се рутински користи у већини лабораторија.

-Изолација захтевних бактерија.

-Опажање узорка хемолизе.

-Извођење дијагностичких тестова.

-Као база за припрему специјалног агар крви за Цоринебацтериум дипхтериае, са цистин-телуритом и јањетином.

-Као је база за припрему јагњећег агамера у крви, плус канамицин-ванкомицин за раст анаероба, посебно Бацтероидес сп.

- за одржавање захтевних сојева (Бацтериотеца).

- Аеробни број микроба у проучавању микробне границе узорака воде, околине, хране и козметике.

Засејано

Узорци се могу сијати директно на површину Триптицасеин сојиног агара са додатком крви или других адитива. Сеје се исцрпљеношћу.

Док се плоче са триптикасеин сојом без адитива углавном користе за субкултуру сојева микроба (бактерија или квасца).

КА

Контрола стерилности

Да бисте проверили стерилност различитих медија припремљених са Триптицасеин сојиним агромом, препоручује се следеће: из сваке припремљене шарже треба инкубирати 1 или 2 неинокулиране плоче или епрувете на 37 ° Ц током 24 сата како би се показала њихова стерилност. У свим случајевима мора остати без раста.

Ако се утврди контаминација, целокупна серија мора се одбацити.

Контрола раста

Следећи бактеријски сојеви могу се користити за проучавање правилног функционисања соја агар триптикасеина: Есцхерицхиа цоли АТЦЦ 8739, Стапхилоцоццус ауреус АТЦЦ 6538, Псеудомонас аеругиоса АТЦЦ 9027 и Ентероцоццус фаецалис АТЦЦ 29212.

Сојеви су засијани и инкубирани аеробно на 37 ° Ц током 24 сата.

У свим случајевима раст мора бити задовољавајући.

Такође се могу користити гљивице попут Цандида албицанс Цомплек АТЦЦ 10231 и Аспергиллус нигер АТЦЦ 16404. Добар раст се очекује за оба соја.

Образац контроле и хемолизе растворног сојиног агарја са додатком крви

Да би се потврдило правилно функционисање крвног агара припремљеног са овом базом, могу се користити следећи сојеви: Стрептоцоццус пиогенес АТЦЦ 19615, Стрептоцоццус пнеумониае АТЦЦ 6305 и Стрептоцоццус пнеумониае АТЦЦ 49619.

Засејане су и инкубиране на 37 ° Ц у микроаерофилности током 24 сата.

У свим случајевима, раст треба да буде задовољавајући, узимајући у обзир да бета-хемолизу (лаган хало око колоније) треба посматрати код С. пиогенес, а алфа хемолизу (зеленкаст хало око колоније) да се примети у оба соја С. пнеумониае. колоније).

Референце

1. Сарадници Википедије Триптицасе Ја сам агар. Википедија, Слободна енциклопедија. 17. децембар 2018, 15:47 УТЦ Доступно на: хттпс://ен.википедиа.орг
2. Британниа Лабораториес. Триптеин сојин агар. 2015. Доступно на: британиалаб.цом
3. Неоген Лабораториес. Триптични сој агар. Доступно на: фоодсафети.неоген.цом
4. Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. (2009). Баилеи & Сцотт Микробиолошка дијагноза. 12 ед. Аргентина. Редакција Панамерицана СА
5. БД Лабораториес. Покушај Ја сам Агар. 2014. Доступно на: .бд.цом