ВОГЕЛ-ЈОХНСОН АГАР: ОБРАЗЛОЖЕЊЕ, ПРИПРЕМА И УПОТРЕБА - БИОЛОГИЈА - 2025

Агар Вогел-Јохнсон је средње селективан и диференцијал културе чврста, специјално формулисан за изолацију Стапхилоцоццус ауреус. Овај медијум су створили Вогел и Џонсон 1960. године од модификације телурит глицин агар коју су 1955. формулисали Зебовитз, Еванс и Нивен.

Модификација се састојала у повећању концентрације манитола присутног у медијуму и уградњи пХ индикатора. Тренутна формула се састоји од триптеина, екстракта квасца, манитола, дикалијум-фосфата, литијум-хлорида, глицина, фенола црвеног, агарја, 1% раствора калијум-телурита и воде.

Извор: Пикинио.цом/Лабораторио де ла Цлиница ПроцреаТец. Флицкр.

Треба напоменути да постоје и други медији који су, попут Вогела-Јохнсоновог агара, селективни за изолацију С. ауреуса, попут сланог манитола и агента Баирд Паркер-а. У том смислу, могло би се рећи да је основа Вогела-Јохнсоновог агара смеша између сланог манитола и агента Баирд Паркер-а.

У првом реду, колоније С. ауреус се одликују ферментацијом манитола и претварањем пХ индикатора у жути. С друге стране, у другој је С. ауреус карактеристичан по редукцији телурита у телур и формирању сиве до црне колоније. Обе особине су примећене у агару Вогел-Јохнсон.

Овај медијум, попут његових колега, користан је за откривање стафилокока ауреуса у узорцима хране, санитарној контроли индустријских производа и клиничким узорцима.

Основе

Снабдевање храњивим састојцима

Средство Вогел-Јохнсон садржи тритеин и екстракт квасца; Обе супстанце пружају аминокиселине дугог ланца које служе као извор угљеника и азота неопходних за раст бактерија. Бактерије способне за раст у овом медију узимаће храњиве састојке из ових супстанци.

Селективна моћ

Вогел-Јохнсон агар је способан да инхибира раст Грам негативних бактерија, па чак и неких Грам позитивних бактерија, погодујући развоју стафилокока позитивних на коагулазе. Супстанце које инхибирају су калијум телурит, литијум хлорид и глицин.

Диференцијална снага

Супстанце које чине овај диференцијални медијум су манитол и калијум телурит. Манитол је угљени хидрат, а када се ферментирају стварају се киселине које средину претварају из црвене у жуту, што се догађа захваљујући присуству показатеља пХ црвеног фенола.

Док безбојни телурит, када је сведен на слободан метални телур, поприми тамно сиву до црну боју.

Стапхилоцоццус ауреус ферментира манитол и смањује телурит у телур. Из тог разлога, типичне колоније С. ауреус у овом медијуму су сиве или црне окружене жутим медијумом.

Бактерије које расту у овом медијуму и не редукују телурит или фермент манитол формираће прозирне колоније окружене медијумом црвене боје, још интензивнијим од оригиналне боје, услед алкализације медијума употребом пептона.

С друге стране, бактерије које смањују телурит, али не ферментирају манитол, постат ће сиве или црне колоније окружене дубоким црвеним медијумом.

Ако је медијум припремљен без додавања калијум-телурита, колоније С. ауреус би се развиле као жуте колоније, окружене жутим медијумом, као у сланом манитарском агару.

Осмотска равнотежа и учвршћивач

Дико калијум фосфат одржава осмотску равнотежу медијума и прилагођава пХ неутралности 7,2. Док агар даје чврсту конзистенцију медијуму за културу.

Припрема

Раствор калијум-телурита 1% в / в

Овај раствор није укључен у дехидрирани медијум, јер се не може стерилисати у аутоклаву. Из тог разлога се припрема одвојено и додаје се у већ стерилисани медијум.

Неке комерцијалне куће продају готов раствор калијум-телурита од 1%. Ако желите да се припремите у лабораторији, поступите на следећи начин:

Измерити 1,0 г калијум-телурита и измерити 100 мл дестиловане воде. Отопите калијум телурит у делу воде и затим допуните количину воде док не достигне 100 мл. Стерилисати раствор методом филтрације.

Вогел-Јохнсон агар база средња

Извагати се 60 гр дехидрираног медијума и растворити у 1 литру дестиловане воде. Смеша се загрева до врења да би се постигло потпуно растварање. Током процеса растварања медијум се често меша.

Стерилизирајте у аутоклаву под притиском од 15 килограма и 121 ° Ц током 15 минута. Уклоните из аутоклава и оставите да се одмара док медијум не достигне температуру од приближно 45 до 50 ° Ц. Додати 20 мл претходно припремљеног 1% раствора калијум-телурита.

Помешати и сипати у стерилне Петријеве посуде. Оставите да се очврсне и нарежите на носаче да се касније чувају у хладњаку до употребе.

Коначни пХ припремљеног медијума треба да буде 7,2 ± 0,2.

Пре сетве узорка, сачекајте да плоча достигне собну температуру.

Боја припремљеног медијума је црвена.

Употреба

Иако се може користити за изолацију С. ауреус у било којој врсти узорака, углавном се користи за микробиолошку анализу фармацеутских производа, козметике и хране.

Препоручује се да инокула буде густа. Сијање се може обавити бодовањем платинастом дршком или површином Дригалски лопатицом.

Плоче се инкубирају на 35-37 ° Ц током 24 до 48 сати аеробиозе.

КА

Следећи контролни сојеви се могу користити за контролу квалитета на медијуму Вогел-Јохнсон:

Стапхилоцоццус ауреус АТЦЦ 25923, Стапхилоцоццус ауреус АТЦЦ 6538, Стапхилоцоццус епидермидис АТЦЦ 12228, Есцхерицхиа цоли АТЦЦ 25922 или Протеус мирабилис АТЦЦ 43071.

Очекивани резултат је сљедећи: за сојеве С. ауреус задовољавајући раст црних колонија окружених жутим средином. За С. епидермидис редован раст са прозирним или црним колонијама окруженим црвеним медијумом.

Исто тако, очекује се потпуна инхибиција Е. цоли, а делимична или потпуна инхибиција за Протеус мирабилис; ако расте, то ће учинити тако штедљиво и колоније ће бити црне окружене црвеном бојом.

Референце

1. БД Лабораториес. ВЈ (Вогел и Јохнсон Агар). 2006. Доступно на: бд.цом
2. Британниа Лабораториес. Вогел- Јохнсон Агар. 2015. Доступно на: британиалаб.цом
3. Британниа Лабораториес. Калијум телурит. 2015. Доступно на: британиа.цом
4. Химедиа Лаборатори. Вогел-Јохнсон Агар Медиум. 2018. Доступно на: химедиалабс.цом/ТД/МУ023.пдф
5. Вогар-Јохнсон Агар Басе. Мерцк приручник за микробиологију. 12. издање, стр. 502-503. Доступно на: Корисници / Тим / Довнлоадс
6. Сарадници Википедије, „Агар Вогел Јонхсон“, Википедија бесплатна енциклопедија, доступан на: википедиа.орг.
7. Венецуелански стандард Цовенин 1292-89. (1989). Фоодс. Изолација и набрајање Стапхилоцоццус ауреус. Доступно на: сенцамер.гоб.ве