- Основе
- карактеристике
- Састав
- Употреба
- Процес
- Бојење гљивичних структура култура
- Директно обојење биолошког узорка
- Бојење герме у идентификацији
- Безбедносни лист лактофенола
- Здравље
- Запаљивост
- Нестабилност
- Посебне опасности
- Референце
Лацтопхенол плаве или плаво памук припремљен са појединачним дие својствима. Користи се у клиничким лабораторијама како би углавном обојила гљивичне структуре као што су хифе, клице и споре.
Помаже у претпостављеној или прелиминарној дијагнози одређених гљивица, међутим, увек је препоручљиво појачати дијагнозу конкретнијим тестовима, као што су биохемијски или серолошки тестови.
Графички приказ мрље од лактофенола, мрља обојена лактофенол плавим, микроскопским препаратом. Извор: публиц Домаин Пицтурес.нет/хттпс://ввв.иоутубе.цом/ватцх?в=П-киФФЗ7НвУ /хттпс://ввв.иоутубе.цом/ватцх?в=вСЗ77Т5Л6е8
Лактофенол плави састоји се од млечне киселине, анилин плаве боје, глицерина, фенола и дејонизоване воде. Може се припремити у лабораторији или се може купити готова за употребу. Једном када је припремљен, спреман је за употребу, ни под којим условима га не разређивати, јер ће ова акција дати страшне резултате.
Концентрација његових састојака чини га идеалним за бојење гљивичних структура, јер фенол елиминише пратећу бактеријску микробиоту, док млечна киселина ствара заштитни филм око структуре гљивица. Коначно, анилин плава боја има афинитет да се придржава структура гљива.
Основе
Лактофенол плавим бојама врши се једноставно бојење гљивичних структура одређене миколошке културе. Назива се једноставним јер користи само једно бојило.
Лактофенол плаво, осим бојења, делује и као разјачивач узорка, захваљујући заједничком деловању млечне киселине и фенола, осим тога, фенол се понаша као мордант и истовремено спречава лизу микроорганизма инхибирајући хидролизне ензиме који могу бити присутни.
Док млечна киселина чува морфологију структуре гљивице.
С друге стране, анилин плава боја има својство лепљења или везивања на структуре које садрже хитин. Структуре су обојене у свијетлоплаву боју.
Треба напоменути да ћелијска стијенка гљивичних микроорганизама, посебно плијесни, садржи хитин, због чега је ова боја идеална за бојење ових микроорганизама.
карактеристике
Раствор лактофенол плаве боје је јако кисела, благо мутна водена боја са светло плавом бојом. Остаје стабилан ако се чува на температури између 15 ° Ц и 25 ° Ц. Боцу треба држати правилно затворену. Надражујуће је и корозивно на кожу и слузокоже.
Састав
Формула за припрему једног литра лактофенол плаве боје је следећа:
-250 г / Л млечне киселине
-1,0 г / Л анилин плава или метил плава
-500 г / Л глицерина
-250 г / Л фенола
-250 мл деионизиране или дестиловане воде.
Фенол је растворен у претходно загрејаној води. Додају се млечна киселина и глицерин и добро измешају. Коначно, анилинско плаво се раствара. Поново се меша и спреман је за употребу.
Порције за припрему 80 мл раствора лактофенол плаве су:
-20 г кристала фенола
-20 мл млечне киселине
-40 мл глицерина или глицерола
-20 мл дестиловане воде.
Употреба
Користи се за бојење гљивичних структура и помоћу морфолошких карактеристика опажених на микроскопском нивоу како би се могла поставити претпостављена дијагноза гљивице.
Процес
Бојење гљивичних структура култура
- Узмите чисту културу гљивице чије се структуре морају посматрати.
- Пожељно радити у поклопцу за ламинарни проток или под упаљачем, користећи маску и рукавице, јер је неопходно да се придржавају стандарда биолошке безбедности, јер се већина калупа лако шири у околини и стога представља опасност за оператера.
- Кап лактофенол плаве боје стави се на слајд.
- Одрежите мали квадрат квалитетне лепљиве траке и врло пажљиво га лепите на крај хладне стерилизоване ручке од платине.
- Платина се приближава нај површнијем делу гљивичне колоније и култура се додирује врло пажљиво, тачно тамо где се налази лепилна трака.
- Затим се одводи до клизача и поставља се тачно на капљицу лактофенол плаве водећи рачуна да се трака савршено продужи и подмаже бојом. Платина је врло деликатно уклоњена.
- Још једна кап лактофенол плаве смештена је на траку, а на врху покривач. Не вршите превише притиска да не бисте уништили структуре гљивице, јер су оне изузетно крхке. Боја треба оставити да делује отприлике 3 до 4 минута.
- Након овог времена, препарат је спреман да се посматра под микроскопом у 10Кс или 40Кс увећању. Ако је потребно посматрање 100Кс, треба користити уље за урањање.
- Структуре гљиве су, углавном, обојене у плаво, с изузетком гнојних гљива које ће задржати своју карактеристичну смеђу боју ове врсте гљива.
Директно обојење биолошког узорка
Ако је потребно да се проучи директан биолошки узорак, попут спутума, гноја, ексудата, секрета, између осталог, они морају имати претходну процедуру за деконтаминацију узорка. За то се користи раствор НаОХ.
У случају узорака косе, они се могу директно обојити.
Неколико захваћених длачица (укупно 10) извађено је из претпостављених лезија тинеа цапитис (алопецијска подручја) и постављено на слајд (3 до 4 длаке по клизишту). Неколико капи лактофенол плаве боје ставимо на врх и одмах прекривамо покривачем.
Ухватите клизач пинцетом и лагано га загрејте гориоником. Да бисте то учинили, направите 3 до 4 брза пролаза кроз пламен. Проматрајте микроскоп на 40Кс и потражите споре изван или унутар длаке (ектотрикс или ендотрик). По потреби додајте урањање и посматрајте на 100Кс.
Бојење герме у идентификацији
После инкубације претпостављене културе Цандида албицанс у људском серуму током 2 до 4 сата на 37 ° Ц, узме се део раствора и обојен лактофенол плавим. Препарат се посматра под микроскопом на 40Кс. Присутна је клица, а бластоспоре обојавају јарко плаву боју.
Безбедносни лист лактофенола
Национално удружење за заштиту од пожара (НФПА) успоставља сигурносни лист за хемијске материје у смислу ризика који представља у различитим аспектима, који су симболизовани обојеним дијамантом и бројем у распону од 0- Четири.
Опасности по здравље идентификоване су плавом бојом, запаљивост црвеном, нестабилност или реактивност у жутој боји, а свака посебна опасност белом бојом.
Здравље
Ризик за здравље који представља лактофенол плава према НФПА је ниво 3. То значи да је супстанца изузетно опасна када се гута или је у директном контакту са кожом или слузницом.
То је веома корозивна и надражујућа материја.
У контакту са кожом и слузницом изазива озбиљне опекотине.
Ако се прогута, може проузроковати главобољу, конфузију, летаргију, несвестицу, заустављање дисања и чак смрт.
Запаљивост
Према НФПА, лактофенол плави је оцењен нивоом 1 за запаљивост. То значи да гори само ако се загрева изнад 94 ° Ц.
Нестабилност
Наведени према НФПА на нивоу 0 (нула) у погледу реактивности. То значи да нема ризика од реактивности, односно да је хемијски стабилна супстанца.
Посебне опасности
Не нуди додатне посебне опасности.
Референце
- САР Лабораторија. Лактофенол плава. 2010. Доступно на: лабсар.цом.
- Примењена лабораторија за клиничку хемију. Лактофенол плаво. 2015. Доступно на: цромакит.ес
- Мерцк Лабораториес. Микроскопија лактофенол плава у раствору. 2017. Доступно на: Корисници / Екуипо / Довнлоадс
- Картица за хитне случајеве Раствор лактофенол плаве боје против гљивица. Универсидад Понтифициа Јавериана, Богота, Колумбија. 2014.Доступно на: јавериана.еду.цо
- Гонзалез М, Диамонт Д, Гутиеррез Б. Техника бојења гљивичних структура биљним бојама као алтернатива не загађује. Биоагро, 2011; 23 (1): 65-68. Доступно на: Редалиц.
- Лабораторија Химедиа. Лактофенол памучно плав. 2017. Доступно од: химедиалабс.цом
- Вангер А, Цхавез В, Хуанг Р, Вахед А, Ацтор Ј, Дасгупта А. Биохемијска испитивања и технике бојења за микробиолошку идентификацију. Сциенце Дирецт, 2017; 61-73. Доступно од: Елсевиер