МИКРОСКОП ТАМНОГ ПОЉА: КАРАКТЕРИСТИКЕ, ДЕЛОВИ, ФУНКЦИЈЕ - БИОЛОГИЈА - 2025

Микроскоп тамна поље је посебан оптички инструмент у појединим лабораторијама. То је резултат модификације направљене на светлосној микроскопији. Даркфиелд микроскопија се може извршити транс-осветљењем или епи-осветљењем.

Прва се заснива на блокирању светлосних зрака који директно допиру до кондензатора, употребом уређаја који се интерполирају пре него што светлосни зраци дођу до кондензатора.

Микроскоп тамног поља / Трепонеми који се виде у микроскопима са тамним пољем. Извор: Диетзел65 / Јудитх Миклосси, Сандор Касас, Анне Д Зурн, Схерман МцЦалл, Схенг Иу и Патрицк Л МцГеер

Тамно поље са пропуштеном светлошћу омогућава истицање грађевина, способно је посматрати изузетно танке честице. Структуре се виде са одређеном ломношћу или светлошћу на тамној позадини.

Док се ефекат епи-осветљења постиже при падајућем или косој светлости. У том случају, микроскоп мора бити опремљен посебним филтром у облику полумесеца.

Са инцидентним осветљењем, посматране структуре се карактеришу тако што представљају визуелни ефекат у великом рељефу. Ово својство омогућава истицање ивица суспендованих честица.

За разлику од светлосне микроскопије, микроскопска микроскопија је посебно корисна за визуелизацију фрески које садрже суспендоване честице, без бојења.

Међутим, има неколико недостатака, укључујући и то што се не могу користити за суве или обојене препарате. Нема добру резолуцију. Поред тога, да би се осигурала добра слика, бројчани отвор циљева не може бити већи од кондензатора.

карактеристике

Састав микроскопа тамног поља представља важне модификације у погледу светлог поља, јер су основе микроскопије супротне.

Док су у светлом пољу светлосне зраке концентрисане тако да директно пролазе кроз узорак, у тамном пољу се зраке распршују тако да у узорак допиру само коси зраци. Затим их исти узорак распршује, преносећи слику ка циљу.

Ако бисте се фокусирали на слајд без узорка, приметио би се тамни круг, јер без узорка нема шта да расипа светлост према циљу.

Да бисте постигли жељени ефекат у визуелном пољу, потребна је употреба одређених кондензатора, као и дијафрагме које помажу у управљању светлосним сноповима.

У видном пољу тамног поља елементи или честице у суспензији изгледају блиставо и ломљиво док је остатак поља таман, што ствара савршен контраст.

Ако се користи косо или ударно светло, у посматраним структурама се добија ефекат ивице са великим рељефом.

Делови микроскопа тамног поља

Извор: амазон.цом

-Механички систем

Тубе

То је уређај кроз који слика одражена и увећана објективом путује док не дође до окулара или окулара.

Комешање

То је подршка у којој се налазе различити циљеви. Циљеви нису фиксни, могу се уклонити. Револвер се може окретати на такав начин да се циљ може мењати када оператер треба.

Макро вијак

Овај вијак користи се за фокусирање узорка, помиче се према напријед или назад како би се узорак помицао ближе или даље од циља, а покрет је гротескан.

Микрометарски вијак

Микрометарски вијак помера се напред или назад да би се узорак померио ближе или даље од циља. Микрометријски вијак користи се за врло фине или осетљиве покрете, готово неприметно. Она је та која постиже крајњи фокус.

Платен

То је ослонац на којем ће се узорак ослонити на тобоган. Има централни отвор кроз који пролазе светлосни зраци. Када се померају вијци за макро и микрометар, степеница се креће према горе или према доле, у зависности од померања вијка.

Аутомобил

Превоз омогућава да се целокупни узорак пређе са циљем. Дозвољени покрети су напред и назад и обрнуто, и с лева на десно и обрнуто.

Држећи пинцете

Налазе се на позорници, израђени су од метала и предвиђени су да држе клизач да се спречи да се преврће током посматрања. Важно је да узорак остане фиксан док се посматра. Причвршћивачи су тачно димензија да приме клизач.

Рука или дршка

Рука спаја цев са базом. То је место на коме се мора држати микроскоп када ће се он премештати са једне на другу страну. Једном руком се хвата рука, а другом руком.

База или стопало

Као што му име каже, то је основа или ослонац микроскопа. Захваљујући бази, микроскоп је у стању да остане фиксан и стабилан на равној површини.

-Оптички систем

циљеве

Они су цилиндричног облика. На дну имају сочиво које увећава слику која долази из узорка. Циљеви могу бити различитог увећања. Пример: 4.5Кс (лупа), 10Кс, 40Кс и 100Кс (потопни циљ).

Циљ потапања је назван зато што захтева постављање неколико капи уља између циља и узорка. Остали се називају сува мета.

Циљеви су штампани са карактеристикама које имају.

Пример: марка произвођача, корекција закривљености поља, корекција аберације, увећање, нумерички отвор, посебна оптичка својства, медијум за урањање, дужина цеви, фокусна дужина, дебљина покрова и кодни прстен боја.

Сочива имају предње сочиво које се налази при дну, а задње леће на врху.

Окулара

Стари микроскопи су монокуларни, односно имају само један окулар, а савремени микроскопи су двоглед, односно имају два окулара.

Очи су цилиндричног и шупљег облика. Унутра имају конвергирајућа сочива која проширују виртуелну слику створену сочивом.

Окулар се придружује цеви. Ово последње омогућава да слика пренесена објективом дође до окулара, што ће је поново повећати.

Окулар у свом горњем делу садржи леће које се називају окулар, а у доњем делу се налази лећа која се зове сакупљач.

Такође има дијафрагму и у зависности од тога где се налази, имаће назив. Они који се налазе између обе леће називају се Хуигенс окулар, а ако се налазе после 2 сочива, то се зове Рамсден окулар. Иако постоје многи други.

Повећање окулара се креће између 5Кс, 10Кс, 15Кс или 20Кс, зависно од микроскопа.

Путем окулара или окулара оператер може видети узорак. Неки модели долазе са прстеном на левом окулару који је покретљив и омогућава подешавање слике. Овај подесиви прстен назива се диоптријски прстен.

-Расвета

Лампа

Извор је осветљења и налази се на дну микроскопа. Светлост је халогена и емитује се одоздо према горе. Уопштено, лампица коју имају микроскопи је 12 В.

Дијафрагма

Дијафрагма микроскопа тамног поља недостаје ирис; у овом случају то спречава да зраке које долазе из лампе директно дођу до узорка, само ће коси зраци додирнути узорак. Оне греде које су раштркане структурама у узорку су оне које ће проћи циљ.

Ово објашњава зашто грађевине изгледају блиставо и блиставо у мрачном пољу.

Кондензатор

Кондензатор микроскопа тамног поља разликује се од светлог.

Постоје две врсте: рефракцијски кондензатори и рефлекторски кондензатори. Потоњи је заузврат подељен у две категорије: параболоиди и кардиоиди.

Кондензатори рефракције

Ова врста кондензатора има диск који је смештен да пребија зраке светлости, може се налазити изнад предњег сочива или на задњој страни.

Врло је лако импровизовати кондензатор ове врсте, јер је довољно да испред предње леће кондензатора ставите диск направљен од црног картона који је мањи од сочива (дијафрагме).

Микроскоп са светлим пољем може се претворити у микроскоп тамног поља помоћу овог савета.

Кондензатори рефлексије

Они су стереоскопски микроскопи. Постоје две врсте: параболоиди и кардиоиди.

• Параболоиди: имају врсту закривљености која се назива параболоиди због сличности са параболом. Ова врста кондензатора широко се користи у истраживању сифилиса, јер омогућава посматрање Трепонема.
• Кардиоид : закривљеност кондензатора слична је срцу, отуда и назив "кардиоид", с истим именом кондензатор. Има дијафрагму која је подесива.

Карактеристике

-Користи се за испитивање присуства Трепонема паллидум у клиничким узорцима.

-Корисно је и посматрати Боррелиас и Лептоспирас.

- Идеално је за посматрање ин виво понашања ћелија или микроорганизама, све док није неопходно детаљити специфичне структуре.

-Идеално је истакнути капсулу или зид микроорганизама.

Предност

-Темски пољски микроскопи са рефрактивним кондензатором су јефтинији.

- Употреба је врло корисна у 40Кс увећању.

-Они су идеални за посматрање узорака који имају индекс лома сличан медијуму на коме се налазе. На пример, ћелије у култури, квасцима или покретним бактеријама, попут спирохета (Боррелиас, Лептоспирас и Трепонемас).

-Челија се може посматрати ин виво, што омогућава процену њеног понашања. На пример, Бровново кретање, кретање флагела, кретање емисијом псеудопода, процес митотске поделе, излежавање ларви, пупољка квасца, фагоцитоза, између осталог.

-Омогућава истакнути ивице структура, на пример капсуле и ћелијског зида.

- Могуће је анализирати раздвојене честице.

- Употреба бојила није неопходна.

Недостаци

-Посебно треба пазити приликом монтирања препарата, јер ако су прегусти, неће се добро уочити.

- Резолуција слика је ниска.

- Микроскопи у тамним пољима који користе рефракцијске кондензаторе имају веома низак проценат светлости.

-За побољшање квалитета слике помоћу уроњеног циља (100Кс) потребно је смањити бројчани отвор бленде и на тај начин повећати квалитет светлосног конуса. За ово је неопходно уградити додатну дијафрагму која може да регулише бројчани отвор бленде.

-Не можете визуализовати суве препарате или обојене препарате, осим ако нису витална бојила.

-Не дозвољава визуелизацију одређених структура, посебно унутрашњих.

- Микроскопи са тамним пољима су скупљи.

Референце

1. "Микроскоп тамног поља." Википедија, Слободна енциклопедија. 26 авг 2018, 00:18 УТЦ 30 јун 2019, 01:06
2. Агудело П, Рестрепо М, Морено Н. Дијагноза лептоспирозе из узорака крви и културе посматрањем под микроскопом тамног поља. Биомедицинска. 2008; 28 (1): 7-9 Доступно са: сциело.орг
3. Родригуез Ф. Врсте оптичких микроскопа. Блог клиничке и биомедицинске лабораторије. Доступно на: франрзмн.цом
4. Сарадници Википедије Микроскопија тамног поља. Википедија, Слободна енциклопедија. 19. октобар 2018, 00:13 УТЦ Доступно на: википедиа.орг
5. Бхатиа М, Умапатхи Б, Наванеетх Б. Процена микроскопије на тамном пољу, културе и комерцијалних серолошких комплета у дијагнози лептоспирозе. Индијски Ј Мед Мицробиол. 2015; 33 (3): 416-21. Доступно на: нлм.них.гов