- Основа и материјали
- материјали
- Кораци
- Макроскопски и микроскопски преглед
- Оригинална техника Фауста
- Фаустова техника центрифугирањем
- Предност
- Недостаци
- Референце
Фауст техника је методологија која омогућава концентрацију неких јаја и / или ларви паразита који се налазе у столици од плута. Користи се када су директни копропараситолошки тестови негативни или када желите да добијете чисте узорке без детритуса.
Методе концентрације за копропараситолошке прегледе су три врсте: флотацијом, седиментацијом или методама које комбинују претходна два. Ове методе повећавају шансе за позитивне резултате.
Анализа столице.
Метода Фауста састоји се од мешања дела узорка столице са супстанцом гушћом од јаја или паразита који треба да буду концентрисани. То узрокује да, мање густи, лебде на површини. Текућина супернатанта се сакупља и посматра под микроскопом ради идентификације и квантификације.
Ова метода се користи за визуелизацију јаја хелминта. Истовремено, показало се да је веома осетљива метода за дијагнозу Гиардиа ламблиа, флагелираног протозоана који је распрострањен широм света. Методе флотације се не препоручују за јака јаја паразита, као што су тракуље и трематоде.
Паразити су једна од најраспрострањенијих цревних инфекција широм света, посебно у сиромашним земљама са лошим санитарним мерама. Из тог разлога, постојање осетљивих метода за идентификацију и квантификацију ових паразита је веома корисно за дијагнозу и лечење.
Основа и материјали
Техника је заснована на постојању различитих специфичних тежина јаја, паразита, циста, личинки и детритуса, користећи растворе цинковог сулфата као флотацијску методу.
Образложење технике је мешање узорка са раствором цинковог сулфата који има већу густину од лакших јаја, личинки или паразита.
Ово омогућава да се таложнији елементи таложе, а лакши елементи плутају који се појављују у супернатанту након центрифугирања узорака.
материјали
Контејнери за прикупљање фекалних узорака (Извор: Бобјгалиндо путем Викимедиа Цоммонс)
- Припремите раствор цинковог сулфата са густином од 1,18 или 1,2 г / мл ако је узорак претходно третиран.
- Припремите сталак са претходно означеним епруветама.
- Имајте центрифугалну машину.
- Имајте при руци дијапозитиве и поклопце за микроскоп. Сви морају бити означени
- Проверите да ли је на располагању Луголово решење за бојење листова.
- Имајте газе за филтрирање.
- Имајте лијевке и дестиловану воду.
- Пронађите пластичне или картонске амбалаже са ознаком.
- Такође апликатори и стерилна дршка од 5 мм.
- Упаљач за стерилизацију дршке.
Кораци
Макроскопски и микроскопски преглед
За било који преглед столице, испитивање започиње оним што се назива "грубим прегледом" узорака.
Описане су конзистентност, боја, присуство крви, присуство слузи и одрасли паразити.
Затим прелазимо на "микроскопски преглед" столице, то зависи од методе. Најједноставнија је метода директног размазивања, што је најједноставнија микроскопска метода посматрања паразита.
Фотографија опажања Гардиа ламблиа, цревног паразита (Извор: Риддлемастер виа Викимедиа Цоммонс)
Поступак укључује постављање мале количине узорка директно на слајд. Ставите неколико капи физиолошког раствора који би требало да буду сличне величине узорка. Мешајте физиолошки раствор са столицом док се не формира хомогена смеша. Поставите покривач и прегледајте под микроскопом.
Оригинална техника Фауста
Други поступак се састоји од методе Фауст флоат, чија се оригинална верзија састоји од:
1- Ставите око два грама измета у прикладну посуду за ову сврху.
2- Додати 30 мл флотационог раствора цинковог сулфата са којим се прави емулзија мешањем раствора са изметом.
3- Ставите металну цједило у други контејнер и пребаците у епрувету.
4- Додајте још раствор флотације док се у епрувети не формира мениск.
5- Ставите стаклену прекривачку на мениск. Оставите да одстоји 10 до 15 минута.
6- Уклоните прекривач и ставите га на клизач који ће се прегледати под микроскопом.
Фаустова техника центрифугирањем
У почетку метода није користила центрифугирање, међутим сада је укључена јер се добијају бољи резултати. Техника укључује низ корака за постизање одговарајуће процедуре, а то су:
1- Измет се испере водом, добро измеша и затим филтрира помоћу газе пресавијене у четири. Узорак се ставља у епрувету.
2- Центрифугирајте и уклоните супернатант (узорци који се чувају изнад воде). Кораци 1 и 2 се понављају док се супернатант не очисти.
3- Цинк сулфат се додаје филтрираном и центрифугираном узорку.
4- Добро се меша.
5- центрифугирајте поново 1 минут при 2500 о / мин (обртаја у минути).
6- Супернатант се добије стерилном петљом од око 5 мм; епрувете не треба трести.
7- Узорак извађен из супернатанта се постави на слајд, а кап Лугола се може ставити у боју, покривач се постави и посматра под микроскопом.
8- Контејнери и епрувете су означени.
Предност
- Елементи који се користе за дијагнозу могу се видети чистима и без „детритуса“, ово олакшава посматрање листа и смањује време коришћено за дијагнозу.
- У супернатанту се опорављају и ларве, јаја и / или цисте.
- То је метода са веома ниским трошковима.
- Процедура је веома једноставна и лака за спровођење.
- Дијагноза је брза и тачна.
- Због важности и високе учесталости паразитозе у сиромашним земљама, ове јефтине и једноставне методе за употребу идеалне су за дијагнозу и праћење ових патологија.
Недостаци
Густина флотационог раствора ствара контракцију личинки, односно смањује се и у врло кратком периоду може да се деформише. То присиљава испитивача да одмах постави дијагнозу и третирани узорци се не могу чувати за будуће претраге.
Као и код свих метода микроскопске идентификације, за постављање тачних дијагноза потребно је високо искусно особље.
Брза деформација елемената неопходних за дијагнозу, иако су очигледан недостатак, може се исправити непосредним микроскопским опажањима.
Референце
- Ананиас, ФЛ (2017). Процена осетљивости Фауст-ове методе и спонтана седиментација за дијагнозу гиардијазе. Кубански часопис за тропску медицину, 68 (2).
- Бартлетт, МС, Харпер, К., Смитх, Н., Вербанац, П., & Смитх, ЈВ (1978). Упоредна процена модификоване технике флотације модификованог цинк сулфата. Часопис за клиничку микробиологију, 7 (6), 524-528.
- Бецкер, АЦ, Краемер, А., Епе, Ц., & Струбе, Ц. (2016). Осетљивост и ефикасност одабраних копроскопских метода-седиментација, комбиноване седиментације-флотације цинковог сулфата и МцМастер методе. Параситологи ресеарцх, 115 (7), 2581-2587.
- Гарциа, Л.С., Арровоод, М., Кокоскин, Е., Палтридге, ГП, Пиллаи, ДР, Процоп, ГВ,… & Висвесвара, Г. (2018). Лабораторијска дијагноза паразита из гастроинтестиналног тракта. Преглед клиничке микробиологије, 31 (1), е00025-17.
- Суммерс, ВА (1942). Модификација методе центрифугалне флотације цинковог сулфата за опоравак хелминтх јајника у формалинизованом измету. Јоурнал оф Параситологи, 28 (4), 345-346.