- Састав урањајућег уља
- Карактеристике уља за урањање
- Основе уља урањања
- Употребе или апликације
- Кораци за посматрање препарата помоћу потапајућег уља
- Нега
- Референце
Потапања Уље је вискозна провидна течност има преламања високим индексом. Из тог разлога се широко користи у микроскопским осматрањима, јер пружа својство концентрисања светлости приликом проласка кроз 100Кс циљ микроскопа, повећавајући његову разлучиву снагу.
То се дешава зато што се између циља и бриса формира вискозни филм који спречава да се светлосне зраке распрше када дођу до ваздуха, концентришући тако светлосне зраке према узорку.
Капица са урањањем уља и микроскопом фокусирана са 100Кс циљем помоћу урањања уља. Извор: Пикабаи.цом
Потопно уље се користи само са циљем 100Кс. Зато се циљ 100Кс назива и потопним циљем. Остали су познати као суве мете. Овај објектив се не може користити без урањања, јер без њега визуализација не би била задовољавајућа.
Главна функција имерзијског уља је да пружи јасније, оштрије и јасније слике, омогућавајући посматрање детаља што код других сочива не би било могуће.
Прво уље коришћено у ту сврху било је анисино уље, коришћено заједно с првом урањајућом сочивом коју је створио Гиованни Баттиста Амици. Ово је само спречило кроматску аберацију, али није повећало бројчани отвор бленде.
Тада се користи кедрово уље, али има много недостатака који су га натерали да употреби. Међу њима је била и висока киселост која је у кратком року наштетила циљевима.
Након тога, друге супстанце попут воде и глицерина коришћене су све док нису створена синтетичка урањајућа уља, која су мало по мало рафинирана док нису стигла до тренутног урањајућег уља, које је сложено једињење органских супстанци.
Састав урањајућег уља
Урањање је састављено од мешавине органских једињења као што су: фефенил, хидрогенирани терфенил, природни угљоводоници и полибутени.
Карактеристике уља за урањање
Иммерсион уље је светло жута течност, благо вискозна по изгледу, карактеристичног мириса и густину између 0.92 до 0.99 г / цм 3 .
Потопно уље није растворљиво у води и има тачку кључања 340 ° Ц. Индекс лома а (н 20 ° Ц / Д): креће се од 1.482 до 1.516. У међувремену, индекс блица је 110 ° Ц, а вискозност се креће од 100 до 120 мПа.с.
Овај производ се мора правилно одлагати, јер је екотоксичан. Другим речима, штетно је за животну средину, углавном утиче на водене животиње. С друге стране, иритира кожу и слузокожу. Ако се гута, то је нефротоксично и кардиотоксично.
Потопно уље је стабилно на 15 до 25 ° Ц, температура на којој се мора чувати.
Основе уља урањања
Када користите сочива већег повећања, интензитет светлости треба повећати. Међутим, многи светлосни зраци се губе јер се распршују када дођу до ваздуха (простор између покривача и сочива), па чак и неки зраци се потпуно рефлектују.
Урањање уље има индекс лома сличан стаклу. Стога, када уље дође у контакт између 100Кс сочива и поклопца, светлосни зраци се концентришу.
Концентроване зраке пролазе кроз узорак и изоштравају слику, односно повећавају бројчани отвор бленде и исправљају кроматске и сферне аберације.
Употребе или апликације
Употреба урањајућег уља је нарочито неопходна када је потребно посматрати слику на шири начин, користећи највиши циљ увећања (циљ 100Кс) да бисте видели детаље који су неопходни за постављање дијагнозе.
Због тога се широко користи у микроскопским студијама у разним областима као што су: хистологија, цитологија, хематологија и бактериологија. На пример, корисно је за проучавање карактеристика ћелија и ткива пацијента.
Такође се користи за анализу крвних мрља, где је неопходно детаљно одредити карактеристике хемопаразита унутар и изван еритроцита, као и у препаратима Грам, да би се дефинисале морфотинториалне карактеристике микроорганизама.
Обично се користи у фиксним препаратима, јер се не препоручује у свежим препаратима. То је зато што површинска напетост уља изазива померање поклопца, што узрокује померање узорка током посматрања и спречава анализу.
С друге стране, урањање уље није корисно само у конвенционалној светлосној микроскопији: користи се и у тоталним флуоресцентним микроскопима са унутрашњим одразом (ТИРФМ) и у конфокалним апликацијама за флуоресценцију.
Кораци за посматрање препарата помоћу потапајућег уља
Да бисте приказали слајд под микроскопом, прво би требало да буде фокусиран са циљем најмањег увећања, обично 10Кс, са малим интензитетом светлости.
Затим се прелази на циљ 40Кс, а светлосни пут је мало повећан. Неке анализе се могу извести при овом увећању, али је потребно 100Кс увећање да бисте видели структурне детаље.
Пре преласка на циљ 100Кс, кап потопљеног уља стави се на покривач, тачно тамо где желите да га посматрате, а затим се купола микроскопа помера да би се пронашао циљ 100к у припреми.
Интензитет светлости се регулише (повећава) (померањем кондензатора и отварањем дијафрагме). Тада би се мали мали покрети вијка микрометра (напред или назад) требали савршено фокусирати ако микроскоп користи парафокалне циљеве.
Ако покушате да фокусирате препарат директно помоћу урањајуће сочива, можда ћете имати проблема да пронађете фокус. Није немогућа акција, али потешкоћа се значајно повећава.
Нега
Да бисте користили урањајуће уље, морају се узети у обзир одређени услови.
Када се направи обојени препарат, као што је мрља обојена Гиемса или Грам, сачекајте да се мрља потпуно осуши пре стављања урањања уља. У супротном, уље заједно са водом формираће мицеле које неће дозволити да се препарат види.
С друге стране, након посматрања серије препарата, то јест на крају радног дана, циљ 100Кс треба пажљиво очистити користећи папир од сочива са етанолом. Ако се сочиво остави прљаво, уље ће се на њему осушити и тада ће га бити врло тешко уклонити, оштетивши видно поље.
Исто тако, мора се узети у обзир да је уље запаљиво и мора се држати даље од извора топлоте (упаљача). Важно је избегавати загревање изнад 65 ° Ц.
Коначно, уље је токсичан производ. Због тога треба избегавати директан контакт са кожом и слузницом, где могу изазвати благу иритацију. Да би се избегле незгоде, препоручује се употреба рукавица и заштитних наочара.
У случају додира са уљем, подручје треба испрати са доста воде. Ако уље прска у очи, треба га опрати на исти начин, држећи очи отворене. У случају случајног гутања, важно је гутати топлу воду и изазвати повраћање, осим одласка до најближег лекара.
Референце
- "Тотални флуоресцентни микроскоп са унутрашњим рефлексијом." Википедија, Слободна енциклопедија. 30 дец 2018, 22:46 УТЦ 14 мај 2019, 01:54
- ИВД. Урањање у микроскопију. Доступно на: Корисници / Тим / Довнлоадс.
- Биолошка екологија и микробиологија. Рад оптичког микроскопа. Доступно на: еумед.нет/либрос.
- Санцхез Лера Рита Мариа, Олива Гарциа Нинфа Роса. Историја микроскопа и његов утицај на микробиологију. Рев Хум Мед, 2015; 15 (2): 355-372. Доступно на: сциело.
- Херреро Ј. Працтице Но. 1: Основе и употреба општег мешавина оптичког микроскопа. Университат д´Алацант Доступно на: руа.уа.ес/дспаце
- Шарлау - МСДС. Урањајуће уље, за микроскопију. 2001. Доступно на: инсумос-лабцентрал.