Размаз је дијагностичка алатка за активно плућне туберкулозе. То је лабораторијска техника која омогућава откривање и мерење брзог киселих бацила као што је Мицобацтериум туберцулосис. То је најчешће коришћена метода широм света за постављање дијагнозе активне плућне туберкулозе у заједници и за процену предности лечења.
Плућна туберкулоза је заразна болест коју изазива Мицобацтериум туберцулосис која инфицира плућа, али може захватити и друге органе и системе. У свету више од 6 милиона људи пати од плућне туберкулозе (ТБ).
Ћелије М. туберцулосис у брису спутума (Извор: Мицрорао / ЦЦ БИ-СА (хттпс://цреативецоммонс.орг/лиценсес/би-са/4.0) виа Викимедиа Цоммонс)
Мицобацтериум туберцулосис и остале не-туберкулозне врсте Мицобацтериум поседују липидни премаз на ћелијској стијенци богатом миколичном киселином која је отпорна на промену боје киселог алкохола након бојења са основним бојама.
Због тога се користе посебне методе бојења као што је Зиехл-Неелсен метода. Ове једноставне и јефтине методе омогућавају зиду да задржи мрљу када се узорак испере са отопином киселине, а зид Мицобацтериум постане црвен за разлику од других бактерија које постану плаве.
Да бисте урадили микроскопију, потребно је узети узорак спутума, по могућности узети га ујутро када устанете. Узорци ткива или узорци течности из тела такође се могу користити.
Процес
Узорци који ће се обрађивати за микроскопију бриса су узорци испљувака, узорци ткива или узорци телесних течности. Узорци ткива могу се извући бронхоскопијом или биопсијама лимфних чворова или других ткива.
Како туберкулоза може да утиче на било који орган или систем, узорци могу бити веома разнолики, укључујући: узорке урина, цереброспиналну течност, плеуралну течност, асцитну течност, крв, гној из отворених шупљина, биопсије итд.
Узорци екстрапулмоналне лезије такође би требали бити обрађени за културу. Узорци спутума сакупљају се у јутарњим часовима након устајања.
Неколико узорака може се прикупити заредом или узастопно. Узорци се требају означити у затвореним боцама са широким устима. Требају имати податке о пацијенту, врсту узорка и датум узимања узорака.
Технички поступак
- Једном када се узорак добије, може се центрифугирати или директно користити. Почетни поступак састоји се од стављања неколико капи узорка и ширења на слајд.
- Узорак је прекривен филтрираним фуксином (раствор за бојење).
- Затим се загрева док не добије око три емисије беличасте паре.
- Сачекајте пет минута да се узорак охлади и исперите водом.
- Прекривен је раствором за бељење (кисели алкохол) током 2 минута.
- Опет се опере водом.
- Узорак је прекривен метилен плавим и остављен је да одстоји једну минуту.
- Испрати се водом.
- Оставите да се осуши на ваздуху и наставите са посматрањем под микроскопом.
Фотографија са микроскопа (Слика Константина Колосова на ввв.пикабаи.цом)
Овај поступак је брз, једноставан, јефтин и омогућава ћелијама Мицобацтериум туберцулосис да постану црвене. Ова техника се назива техником бојења Зиехл-Неелсен.
Микроскопско проматрање састоји се од идентификације присуства брзо киселинских бацила и њиховог квантификације по пољу.
Микобактеријске ћелије туберкулозе изгледају као црвене, зрнате, закривљене шипке на плавој позадини. Могу бити изоловани, упарени или груписани. Посматрање треба обавити по пољу, а најмање 100 поља треба испитати за сваки брис.
Резултат се сматра позитивним када у сваком пољу има више од 10 М. ћелија туберкулозе. То одговара 5.000 до 100.000 бацила за сваки милилитер узорка.
У тим се случајевима сматра позитивним за Мицобацтериум туберцулосис, јер неттуберкулозни Мицобацтериум или друге киселине отпорне на киселине имају различите облике и генерално количина која се посматра по пољу је мања од 10.
Особа која испитује узорак мора имати искуство или стручност у откривању и препознавању ових микроорганизама, јер у резултатима могу постојати лажни негативи или лажни позитивни резултати.
Постоје и друге флуороскопске технике које су осетљивије, али много скупље. Једна таква техника користи обојење Аурамине-О да би се добила зелена флуоресценција или обојење Аурамине О / Родамином Б за посматрање жуте / наранџасте флуоресценције.
Позитивни случајеви се углавном спроводе на култури и антибиограму како би се потврдила дијагноза и примерена селекција лечења.
За шта се микроскопија користи?
Туберкулоза је заразна болест која погађа плућа и друге органе и систем органа у телу. То је заразна болест која производи озбиљне повреде респираторног система које, ако се не лече правилно, могу проузроковати смрт пацијента.
Туберкулоза се преноси готово искључиво капљицама, суспендираним у ваздуху, из експекторације пацијента зараженог плућном туберкулозом. Те мале капљице могу остати у ваздуху и имати способност да заразе особу која их удише.
М. туберцулосис ћелије (Извор: НИАИД / ЦЦ БИ (хттпс://цреативецоммонс.орг/лиценсес/би/2.0) виа Викимедиа Цоммонс)
Инфекција захтева продужено време контакта са зараженим пацијентом који непрестано испљува бациле у слабо проветреном окружењу. Људи са имунодефицијенцијом имају већу вероватноћу да се заразе.
ХИВ-позитивни пацијенти имају већу вјероватност да ће развити озбиљне респираторне инфекције, укључујући плућну туберкулозу од остатка популације. Отуда значај микроскопије бриса као брза и јефтина дијагностичка метода за туберкулозу.
Микроскопија брисом омогућава да се постави бактериолошка дијагноза туберкулозе, али позитиван резултат мора бити потврђен другим студијама.
Студије које потврђују дијагнозу туберкулозе укључују радиолошка испитивања која показују карактеристичне слике горњих режња плућа, позитивне тестове туберкулина и позитивне културе узорка.
Размаз негативан
Микроскопија са негативним брисом не искључује нужно дијагнозу туберкулозе, јер посебно када је узорак испљунут, елиминација бацила није стална. Због тога су у овим случајевима, када се сумња на дијагнозу, неопходни серијски узорци.
Позитиван размаз
Позитивна микроскопија бриса указује на туберкулозу и мора се потврдити другим комплементарним студијама. Кад год је резултат позитиван, треба урадити културу и антибиограм.
Једном када се третман успостави, континуирано смањење скале позитивности микроскопије размаза до добијања негативних резултата омогућава контролу предности лечења.
Референце
- Азиз, МА (2002). Екстерна процена квалитета микроскопије бриса АФБ.
- Десикан, П. (2013). Микроскопија бриса спутума код туберкулозе: да ли је још увек релевантна ?. Индијски часопис за медицинска истраживања, 137 (3), 442.
- Фауци, АС, Каспер, ДЛ, Хаусер, СЛ, Јамесон, ЈЛ, и Лосцалзо, Ј. (2012). Харрисонови принципи интерне медицине (Вол. 2012). ДЛ Лонго (ур.). Нев Иорк: Мцграв-Хилл.
- Нгабонзиза, ЈЦС, Ссенгооба, В., Мутуа, Ф., Торреа, Г., Дусхиме, А., Гасана, М.,… & Мувунии, ЦМ (2016). Дијагностичка перформанса микроскопије размаза и инкрементални принос Ксперта у откривању плућне туберкулозе у Руанди. БМЦ заразне болести, 16 (1), 660.
- Сардинас, М., Гарциа, Г., Росарис, ММ, Диаз, Р., & Медерос, ЛМ (2016). Важност контроле квалитета бацилоскопије у лабораторијама које врше дијагнозу туберкулозе. Чилеански часопис за инфектологију: Службени орган чилеанског Друштва за инфектологију, 33 (3), 282-286.
- Др. Секуеира де Латини, МД и Баррера, Л. (2008). Приручник за бактериолошку дијагнозу туберкулозе: стандарди и технички водич: део 1 микроскопија за брисање. У Приручнику за бактериолошку дијагнозу туберкулозе: стандарди и технички водич: део 1 микроскопска бриса (стр. 64-64).