ТРИПТИЦАСЕИН СОЈИН БУЈОН: ОСНОВА, ПРИПРЕМА И УПОТРЕБА - БИОЛОГИЈА - 2025

Соја чорба триптона је течно култивирани медиј, изузетно хранљива, неселективни. Због велике свестраности, једно је од најчешће коришћених течних култура у лабораторији за микробиологију.

Познат је и по називу триптичиног сојиног бујона или дигестираног казеин-соје, чија скраћеница је ТСБ за акроним на енглеском Триптиц Сои бротх или ЦСТ за акроним на шпанском. Употреба му је веома разнолика због састава. Састоји се од триптеина, сојиног пептона, натријум-хлорида, ди-калијум-фосфата и глукозе.

Пробавни сој соје сетрипасеина засијан сојем Псеудомонас аеругиноса АТЦЦ 27853, где се примећује производња пигмента. Извор: Фотографију направио аутор МСц. Мариелса Гил.

Способна је да репродукује клинички важне патогене бактерије, укључујући оне које су нутритивно захтевне и анаеробне бактерије. Неке опортунистичке и контаминирајуће гљиве такође се могу развити у овом окружењу.

Због велике храњиве моћи, он има високу осетљивост на откривање микробне контаминације, због чега ју је изабрала Служба здравствене заштите животиња и биљака УСДА за микробиолошку анализу вакцина.

Исто тако, сој бујон триптикасеина испуњава захтеве различитих фармакопеја (европски ЕП, јапански ЈП и северноамерички УСП) за микробиолошка испитивања производа на индустријском нивоу, као што су козметика и храна.

С друге стране, вреди напоменути да је овај медиј упркос великој употребљивости релативно јефтин, што га чини приступачним за већину микробиолошких лабораторија. Такође је врло лако припремити.

Основе

Триптеин, пептон и глукоза пружају суштинска хранљива својства, што га чини идеалним медијумом за брзи раст микроба.

У приближно 6 до 8 сати инкубације, раст се већ може приметити код већине микроорганизама. Међутим, постоје споро растући сојеви који могу расти данима.

Натријум-хлорид и дикалијум-фосфат делују као осмотски баланс и регулатор пХ. Присутност раста сведочи појавом замућености у медијуму; ако нема раста, медијум остаје прозиран.

Због своје светлосне боје могуће је посматрати производњу пигмената, попут оног приказаног на слици која се налази на почетку чланка, а који одговара пигменту који производи Псеудомонас аеругиноса.

Припрема

-Триптисеин сојин бујон

Да бисте припремили покров соја од соје, мора се дигитално измерити 30 г дехидрираног комерцијалног медијума. Затим се раствара у литру дестиловане воде која се налази у тиквици.

Смеша се остави да почива 5 минута, а затим се однесе у извор топлоте да се раствара медијум. Треба је често мешати док кључају 1 минут.

Једном када се раствори, дистрибуира се у епрувете одговарајуће величине по потреби. Могу се користити цеви са памучним чеповима или са бакелитним капицама. Након тога епрувете се стерилишу са медијумом у аутоклаву на 121 ° Ц током 15 минута.

ПХ медијума мора остати на 7,3 ± 0,2

Треба напоменути да је боја дехидрираног медија за културу светло беж боје и треба је чувати на температури од 10 до 35 ° Ц, на сувом месту. Док је припремљени чорб светло жуте боје, треба га чувати у фрижидеру (2 до 8 ° Ц).

- Варијанти пробавног сојиног бујона

Измена модификованог триптицасеин соје може се припремити додавањем жучних соли и новобиоцина како би се учинио селективним за изолацију Е. цоли. Друга могућност за исту сврху је припремање сојиног бујона трипсина са додатком ванкомицина, цефиксима и телурита (2,5 µг / мл).

С друге стране, више глукозе (0,25%) се може додати у сојин бујон соје, када је циљ подстицање стварања биофилма.

Употреба

Довољно је храњива да омогући раст прекомерних или прекомерних бактерија као што су Стрептоцоццус пнеумониае, Стрептоцоццус сп и Бруцелла сп, без потребе да се допуњују крвљу или серумом.

Исто тако, неке гљивице се могу развити у овом бујону, попут Цандида албицанс Цомплек, Аспергиллус сп и Хистопласма цапсулатум.

Даље, овај медијум у анаеробним условима је идеалан за опоравак бактерија из рода Цлостридиум, као и неспортских анаеробних бактерија од клиничког значаја.

Ако се дода 6,5% натријум хлорида, може се користити за раст ентерокока и других стрептокока групе Д.

На нивоу истраживања, био је веома користан у разним протоколима, посебно у истраживању биофилма или бактерија које формирају биофилм. Такође се користи за припрему бактеријске суспензије од 0,5% Мац Фарланда неопходне за извођење антибиограма Кирби и Бауер методом.

У овом случају се узму 3 до 5 колонија сличног изгледа и емулгирају у 4-5 мл соја из соја триптихицаин. Потом се инкубира током 2 до 6 сати на 35-37 ° Ц и затим се подешава на жељену концентрацију употребом стерилног физиолошког раствора. Триптицасеин сојине јухе не смеју се користити од 18 до 24 сата инкубације.

Засејано

Узорак се може сејати директно или се могу субкултивирати чисте колоније узете из селективних медија. Инокуулум треба да буде мали да не би замутио медијум пре инкубације.

Обично се инкубира у аеробиози на 37 ° Ц током 24 сата, али ови услови могу да варирају у зависности од микроорганизма који се тражи. По потреби се може инкубирати у анаеробним условима на 37 ° Ц током неколико дана. На пример, брзорастући или брзи микроорганизми могу се инкубирати до 7 дана.

У микробиолошкој анализи фармацеутских супстанци - попут вакцина - протоколи су строжи. У тим случајевима, јуха без раста не одбацује се док не достигне 14 дана континуиране инкубације.

КА

Из сваке припремљене шарже треба инкубирати 1 или 2 инокулиране епрувете како би се показала њихова стерилност. Мора остати непромењен.

Такође се могу засадити познати сојеви како би се проценило њихово понашање. Међу сојевима који се могу користити су:

Аспергиллус брасилиенсис АТЦЦ 1604, Цандида албицанс АТЦЦ 10231, Бациллус субтилис АТЦЦ 6633, Стапхилоцоццус ауреус АТЦЦ 6538 или 25923, Есцхерицхиа цоли АТЦЦ 8739, Стрептоцоццус пиогенес АТЦЦ 19615, Стрептоцоццус пнеумониае АТЦЦ28ЦЦ305, пнеумониае АТЦЦ28омонас 905, пнеумоније АТЦЦ28омонас305.

У свим случајевима, раст мора бити задовољавајући у одговарајућим атмосферским и температурним условима за сваки микроорганизам.

Ограничења

-Ферментација глукозе узрокује пад пХ медијума услед производње киселина. Ово може бити неповољно за опстанак неких микроорганизама осетљивих на киселост.

-Не препоручује се за одржавање сојева, јер поред киселости, бактерије исцрпљују храњиве материје после неколико дана са последичним накупљањем токсичних супстанци које чине околину неприступачном.

- Морате радити на томе да пазите на све протоколе стерилности, јер су бујони лако контаминирани.

-Кад припремите соје са триптикасеином, не би требало да покушавате да пребаците јуху у другу стерилну епрувету, јер је ова врста маневра веома осетљива на контаминацију.

Референце

1. Цона Е. Услови за добру студију осетљивости агар дифузијским тестом. Рев. цхил. инфектол. 2002; 19 (2): 77-81. Доступно на: сциело.орг
2. Британниа Лаборатори. Триптеин соје. 2015. Доступно на: британиалаб.цом
3. МЦД Лабораторија. Триптицасеин сој чорба. Доступно на: елецтрониц-системс.цом
4. Неоген Лаборатори. Триптих сој бујона. Доступно на: фоодсафети.неоген.цом
5. Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. (2009). Баилеи & Сцотт Микробиолошка дијагноза. 12 ед. Редакција Панамерицана СА Аргентина.
6. Ројас Т, Васкуез И, Реиес Д, Мартинез Ц, Медина Л. Процена технике магнетне имуносепарације за опоравак Есцхерицхиа цоли О157: Х7 у млечним кремама. АЛАН. 2006; 56 (3): 257-264. Доступно на: сциело.орг.ве
7. Гил М, Мерцхан К, Куеведо Г, Санцхез А, Ницита Г, Ројас Т, Санцхез Ј, Финол М. Формирање биофилма у изолатима Стапхилоцоццус ауреус према антимикробној осетљивости и клиничком пореклу. Витае. 2015; 62 (1): 1-8. Доступно на: сабер.уцв.ве
8. Нарваез-Браво Ц, Царруио-Нунез Г, Морено М, Родас-Гонзалез А, Хоет А, Виттум Т. Изолација Есцхерицхиа цоли О157: Х7 у узорцима говеда са двоструком наменом из општине Миранда, држава Зулиа, Венецуела. Влч. Циент (Марацаибо), 2007; 17 (3): 239-245. Доступно на: сциело.орг